| 查看: 2336 | 回复: 31 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】请教达人：想找出两个细菌中差异表达的基因，有什么成熟且便宜的方法？
|
|||
| 现有两株细菌，暂命名为1和2，其中2对于某种抗逆环境具有更高的抵抗力，现在想找出在这种环境下两个菌株差异表达的基因，不知有什么办法？其中菌1已经完成了基因组测序，菌2未测序，由于经费有限，不太可能采用全基因组芯片方法，请教各位达人，有什么既便宜又比较成熟的方法？不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教有机机制达人，一个反应机理~~~~
已经有8人回复
- 金币请教达人一求方差的问题，十分着急，要考试了！
已经有16人回复
- 跪求概率论达人问题有关version的问题！！！
已经有4人回复
- 有关2012csc申请的几个问题，请达人踊跃回答
已经有21人回复
- 请教有经验的有机达人——过柱分离问题
已经有10人回复
- 大清早发个求助帖，求微生物达人从形态上鉴别一下这是什么菌
已经有19人回复
- 请问申请北美留学paper的价值问题，求达人帮忙
已经有7人回复
- 请达人帮忙看一下，编辑如下的拒稿理由能否debate一下
已经有6人回复
- 【讨论】请教达人：混合表面活性剂的浓溶液为什么很容易会结皮？
已经有7人回复
- 【求助】向各位前辈达人请教户口问题
已经有10人回复
- 对于一句话的理解~~达人帮帮忙！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】16s进化树+细菌鉴定 达人 请进~~~
已经有5人回复
- 【求助】请问各位食品达人，水中总大肠菌群如何测定？
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
北京理工大学郑长松教授课题组诚招2026年秋季博士/硕士研究生
+3/362
-
浙江师范大学国家杰青杨启华教授团队招收2026年博士研究生
+1/87
-
科瑞赛生物内皮细胞培养基试用装限时大放送，助力你的实验高效进阶！
+1/84
-
上海师范大学生物医用材料方向招收2026级博士研究生
+1/84
-
湖南师范大学医工交叉科研团队招收计算机博士生
+1/80
-
澳门大学智慧城市物联网国重“结构智能感知、健康监测与无损检测”研究方向博士后招聘
+1/77
-
美国密歇根州立大学林学系杜海顺课题组招收全奖博士生及联合培养博士生
+1/75
-
考核制博士自荐
+1/39
-
深圳信息职业技术大学-博后招聘（优秀可留校）
+1/31
-
北京林业大学木质素高值化利用创新团队招收2026年入学博士生
+1/26
-
SCI，计算机相关可以写
+1/20
-
信息工程大学教授团队网络空间安全专业博士招生【2026年1月31日报名截止】
+1/15
-
2026年黄河科技学院纳米功能材料研究所招聘
+2/14
-
【博士后/科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/9
-
长江学者团队招聘药学/生物信息学等方向高校教师7名(地点杭州、有事业编)+博后5名
+1/8
-
上海交通大学环境学院（环境化学与环境毒理学；大数据与人工智能）博士后招聘～
+1/7
-
香港科技大学 Abhishek Kumar Srivastava 教授课题组 招收博士生
+2/6
-
浙江大学傅杰团队(杰青)高薪招聘博士后1
+1/3
-
土木、交通工程专业博士后站有吗？（无博士毕业3年要求+可接受兼职博后）
+1/1
-
电子科技大学激光与光子制造团队招硕士博士
+1/1
16楼2010-12-09 10:24:21
3楼2010-12-07 22:33:42
4楼2010-12-07 23:34:29
★ ★ ★
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
|
Non-radioactive RNA fingerprint procedure First strand cDNA synthesis was performed with 15 mg of total RNA, 500 pmol oligo(dT)18 and 800U Superscript II reverse transcriptase (Life Technologies) in a volume of 100ml RT buffer, following the manufacturer’s instructions. After heat inactivation of reverse transcriptase and RNase A digestion, reaction products were purified from excess oligonucleotides by using a QIAquick kit (Qiagen). cDNA derived from 75 ng of total RNA was used as template for PCR. Amplification was performed in 20 ml of PCR buffer (10mM Tris-Cl pH 8.3, 50mM KCl, 1.5mM MgCl2) with 125mM dNTPs (Pharmacia) and 1mM each primer. For each reaction, two 18-mer oligonucleotides, of arbitrary sequence and a GC content of 61%, were used. Sequences of all 131 oligonucleotides used in this screen can be obtained upon request. All PCR amplifications were performed on an Omni-Gene thermal cycler (Hybaid). After 2 min of denaturation at 948C, 2 units of Taq DNA polymerase (Roche) were added (manual ‘hot start’). After 1 min at 948C, the profile was started with two, low-stringency cycles (948C for 1.5 min, 508C for 3.5 min and 728C for 3 min) followed by 35–40 high-stringency cycles (948C for 1 min, 658C for 1 min, and 728C for 1 min), and a final 5 min extension at 728C. Reaction products were separated on 2% SeaKem LE agarose gels (FMC) for 3.5 h at 6– 7Vcm21 and 88C. Gel and running buffer was 0.5X TBE (50mM Tris-borate pH 7.9, 1mM Na2-EDTA) containing 5mgml21 ethidium bromide. Bands of interest were excised, DNA was eluted with a Jetsorb kit (Genomed) and the amplicons were cloned directly by using a Topo TA cloning kit (Invitrogen). 这种方法比较的原始，应该比较的便宜 |
5楼2010-12-08 04:32:53