| 查看: 2494 | 回复: 31 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】请教达人：想找出两个细菌中差异表达的基因，有什么成熟且便宜的方法？
|
|||
| 现有两株细菌，暂命名为1和2，其中2对于某种抗逆环境具有更高的抵抗力，现在想找出在这种环境下两个菌株差异表达的基因，不知有什么办法？其中菌1已经完成了基因组测序，菌2未测序，由于经费有限，不太可能采用全基因组芯片方法，请教各位达人，有什么既便宜又比较成熟的方法？不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有172人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教有机机制达人，一个反应机理~~~~
已经有8人回复
- 金币请教达人一求方差的问题，十分着急，要考试了！
已经有16人回复
- 跪求概率论达人问题有关version的问题！！！
已经有4人回复
- 有关2012csc申请的几个问题，请达人踊跃回答
已经有21人回复
- 请教有经验的有机达人——过柱分离问题
已经有10人回复
- 大清早发个求助帖，求微生物达人从形态上鉴别一下这是什么菌
已经有19人回复
- 请问申请北美留学paper的价值问题，求达人帮忙
已经有7人回复
- 请达人帮忙看一下，编辑如下的拒稿理由能否debate一下
已经有6人回复
- 【讨论】请教达人：混合表面活性剂的浓溶液为什么很容易会结皮？
已经有7人回复
- 【求助】向各位前辈达人请教户口问题
已经有10人回复
- 对于一句话的理解~~达人帮帮忙！！！
已经有3人回复
- 【求助/交流】16s进化树+细菌鉴定 达人 请进~~~
已经有5人回复
- 【求助】请问各位食品达人，水中总大肠菌群如何测定？
已经有8人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
医学超声影像负责人招聘-中国科学院赣江创新研究院
+1/980
-
985教授征女友
+1/252
-
哈工大医康学院材料模拟计算方向人才招聘
+1/78
-
山东征女友，坐标济南
+1/69
-
香港中文大学医学院 诚聘 研究助理教授 (医工结合/生物信息学方向)
+1/36
-
中国农业大学安杰课题组招聘科研助理（表现优异者可提供读博机会）
+1/31
-
同济大学脑机智能团队脑机接口方向招生招聘
+1/30
-
同济大学脑机智能团队脑机接口方向招生招聘
+1/29
-
上海交大药学院侯四化课题组招收2名2026年秋季入学申请-考核制博士生
+1/26
-
中科院深圳先进技术研究院招联培学生 -- 多中心大队列数据已就绪，助你快车道产出成果
+1/10
-
电子科技大学李世彬课题组招聘传感器方向博士及博士后
+1/10
-
中国科学技术大学环境系招生
+1/9
-
中科院深圳先进技术研究院招聘免疫及计算生物学方向博士后、科研助理或联培学生
+1/9
-
澳门大学生物医学影像实验室诚招博士生（2026秋季入学）
+1/7
-
广东工业大学马琳教授课题组招收2026年博士（材料物理与化学、光学专业）
+1/4
-
澳科大招收2026年秋季药剂学/生物材料方向全奖博士研究生（春节不打烊）
+1/4
-
澳科大药学院诚招2026年秋季药剂学/生物材料硕士研究生（2026年3月5日报名截止）
+1/4
-
【科研助理招聘-北京理工大学-集成电路与电子学院-国家杰青团队】
+1/3
-
【经验分享】CRISPR基因敲除细胞系构建全流程踩坑指南——从递送方式选择到克隆筛选
+1/2
-
26储能博士申请自荐
+1/2
15楼2010-12-09 10:21:39
3楼2010-12-07 22:33:42
4楼2010-12-07 23:34:29
★ ★ ★
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
qinjysdu(金币+2):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~ 2010-12-08 08:15:07
|
Non-radioactive RNA fingerprint procedure First strand cDNA synthesis was performed with 15 mg of total RNA, 500 pmol oligo(dT)18 and 800U Superscript II reverse transcriptase (Life Technologies) in a volume of 100ml RT buffer, following the manufacturer’s instructions. After heat inactivation of reverse transcriptase and RNase A digestion, reaction products were purified from excess oligonucleotides by using a QIAquick kit (Qiagen). cDNA derived from 75 ng of total RNA was used as template for PCR. Amplification was performed in 20 ml of PCR buffer (10mM Tris-Cl pH 8.3, 50mM KCl, 1.5mM MgCl2) with 125mM dNTPs (Pharmacia) and 1mM each primer. For each reaction, two 18-mer oligonucleotides, of arbitrary sequence and a GC content of 61%, were used. Sequences of all 131 oligonucleotides used in this screen can be obtained upon request. All PCR amplifications were performed on an Omni-Gene thermal cycler (Hybaid). After 2 min of denaturation at 948C, 2 units of Taq DNA polymerase (Roche) were added (manual ‘hot start’). After 1 min at 948C, the profile was started with two, low-stringency cycles (948C for 1.5 min, 508C for 3.5 min and 728C for 3 min) followed by 35–40 high-stringency cycles (948C for 1 min, 658C for 1 min, and 728C for 1 min), and a final 5 min extension at 728C. Reaction products were separated on 2% SeaKem LE agarose gels (FMC) for 3.5 h at 6– 7Vcm21 and 88C. Gel and running buffer was 0.5X TBE (50mM Tris-borate pH 7.9, 1mM Na2-EDTA) containing 5mgml21 ethidium bromide. Bands of interest were excised, DNA was eluted with a Jetsorb kit (Genomed) and the amplicons were cloned directly by using a Topo TA cloning kit (Invitrogen). 这种方法比较的原始，应该比较的便宜 |
5楼2010-12-08 04:32:53