应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教质粒构建问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1754  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

huangqihong

兑换贵宾

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[交流] 【求助/交流】请教质粒构建问题 已有9人参与

我有一个6kb左右的片段要连到载体上，而载体的大小只有5kb多，最近我用片段与载体比例大约为1:2-1:3进行连接，但一直没有得到克隆，请问是不是这样的比例不行，我该用多少的比例进行连接？谢谢指教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-11-30 01:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaohq1209

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
Originally posted by lyl19860712 at 2010-11-30 10:35:12:
质粒和片段比例应该是1:5到1：8，片段应该多些，片段和质粒都要纯。质粒和片段比例计算：质粒/片段（摩尔比例）=A，质粒/片段(分子质量)＝Ｂ，质粒浓度／片段浓度（ｎｇ／ｕｌ）＝Ｃ，　质粒/片段(体积)＝ｘ，则ｘ ...

两者的比例跟连接效率有关，如果做的次数和量够多的话，比例不是最关键的，酶切倒是影响很大。
赞一下 回复此楼
我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
8楼2010-11-30 13:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

iaminxanadu

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-30 08:34:48
外源片段要多些，即便你的外源片段较载体大。你的比例好像反过来差不多。
如果还连不上，就采用把体系做的浓点，转化时多转点。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-11-30 08:31:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

littlehong

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-11-30 08:35:07
连接的时候，比例应该是片段：质粒=5：1，或者更高才行
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-11-30 08:33:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

最爱花诗雨

超级版主

穷鬼

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个有严格的比例限制吗？应该是构建好的质粒大小不要太大就ok了吧。
赞一下(1人) 回复此楼
严于律己，宽以待人
4楼2010-11-30 09:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物与医药考研调剂 +3 铁憨憨123425 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:53 by judy105
[考研] 生物学296求调剂 +10 汤圆包 2026-03-29 14/700 2026-04-01 10:44 by 求调剂zz
[考研] 318求调剂 +8 七忆77 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:37 by Jaylen.
[考研] 348求调剂 +7 zzzzyk123 2026-04-01 7/350 2026-04-01 10:17 by 唐沐儿
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +15 Doleres 2026-03-31 16/800 2026-04-01 09:49 by lfj11
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +10 10213207 2026-03-31 10/500 2026-04-01 08:28 by Linda Hu
[考研] 322求调剂 +4 熹僖XX 2026-03-31 4/200 2026-04-01 08:21 by JourneyLucky
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +20 Mr. Z 2026-03-25 21/1050 2026-03-31 16:53 by Zzxxxs
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 8/400 2026-03-31 08:53 by Qshers
[考研] 一志愿食品科学与工程083200求调剂 +4 XQTJZ 2026-03-30 4/200 2026-03-31 04:10 by fmesaito
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +5 小张zxy张 2026-03-26 10/500 2026-03-31 00:29 by jp9609
[有机交流] 甲基亚磺磺酸钠和甲基磺酸酯反应机理 10+3 kaobao456 2026-03-29 4/200 2026-03-30 23:16 by nBu锂
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 105500药学求调剂，一志愿山东大学药学，348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 290求调剂 +3 dfffsar 2026-03-29 3/150 2026-03-29 22:38 by 毛毛毛阿莫2
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭