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【求助】凝胶G100越走越慢~
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ci1957
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【求助】凝胶G100越走越慢~
请教
我是新人
G100 凝胶 新的 第一次用
10g干胶150ml 水溶胀
柱子1cm 1.2m
上样量200mg (5ml水稀释)
纯净水洗脱
开始大概40分钟走10ml
走了大概6 、7 管 现在越走越慢 现在1小时 才走5ml
我没有把压力开很大
可能是堵了 现在该怎么办 另外为什么会这样呢
我哪里出错了吗
[
Last edited by ci1957 on 2010-11-26 at 08:50
]
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2010-11-25 20:00:55
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ci1957
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2010-11-25 22:00:14
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qinhy(金币+1):多谢指教,欢迎常来药学版! 2010-12-19 16:08:44
你的上样量有点大了,1.2的柱子上不了那么多样品的,再有就是可能你的柱子没有平衡好,胶没压实,就前面流速大后面小了
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2010-12-18 14:25:36
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2010-12-21 20:26:25
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ci1957
at 2010-11-25 22:00:14:
自己顶
那G100 多久10ml是正常的呢 我现在一个半小时 是不是也太长了点 到底哪里出问题了呢
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5楼
2010-12-21 20:27:59
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ylchen0902
at 2010-12-18 14:25:36:
你的上样量有点大了,1.2的柱子上不了那么多样品的,再有就是可能你的柱子没有平衡好,胶没压实,就前面流速大后面小了
我现在换成了内径5cm 填料高40cm的柱子 也是1个半小时10ml 这到底是为什么呢 不应该这么慢啊
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6楼
2010-12-21 20:30:58
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qinhy(金币+1):多谢指教!欢迎常来药学版! 2010-12-22 19:45:43
你是普通的常压柱么?如果是,会不会是下面棉花塞得太紧了?
我没有用过你这个型号的凝胶,但有没有可能就是纯水的黏度太大,导致流速变慢?凝胶的洗脱剂好像很少有用纯水的。
你后来吧柱子换成内径5cm 填料高40cm的了?你不想把它当凝胶用了么?那么粗短的柱子分离效果应该不会太好了
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7楼
2010-12-22 10:57:14
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ci1957
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婉歆轩
at 2010-12-22 10:57:14:
你是普通的常压柱么?如果是,会不会是下面棉花塞得太紧了?
我没有用过你这个型号的凝胶,但有没有可能就是纯水的黏度太大,导致流速变慢?凝胶的洗脱剂好像很少有用纯水的。
你后来吧柱子换成内径5cm 填料高 ...
没有塞棉花下面
下面是一层膜
细长柱子一点都过不动
所以才换了短柱子
G25的 我过了 很好过
但这个G100的 装上就很慢
我也不知道为什么
我也觉得可能是水粘度太大
如果加点盐 会好点吗?
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8楼
2010-12-23 09:09:06
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这个我就不清楚了,不好意思啦
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2010-12-23 15:44:37
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chzhbin(金币+1):谢谢交流 2010-12-24 08:19:34
你加压过凝胶 肯定越来越实 越来越慢啊 一般凝胶柱是不能加压的 会破坏它的分子筛结构
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2010-12-24 01:28:47
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karl2100(金币+1):谢谢参与讨论! 2010-12-24 21:04:41
凝胶的原理就是溶胀了形成网孔,从而具有分子筛的功能,你加压应该会破坏的吧,我们实验室基本是常压过的!个人见解,不一定对!
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11楼
2010-12-24 14:35:33
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lazierboy
at 2010-12-24 01:28:47:
你加压过凝胶 肯定越来越实 越来越慢啊 一般凝胶柱是不能加压的 会破坏它的分子筛结构
一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力 恒流泵
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12楼
2010-12-26 23:59:24
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Cpuli87
at 2010-12-24 14:35:33:
凝胶的原理就是溶胀了形成网孔,从而具有分子筛的功能,你加压应该会破坏的吧,我们实验室基本是常压过的!个人见解,不一定对!
一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力 恒流泵
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http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2634154&pid=1392666&page=2#pid1392666
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2010-12-26 23:59:47
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lazierboy
at 2010-12-24 01:28:47:
你加压过凝胶 肯定越来越实 越来越慢啊 一般凝胶柱是不能加压的 会破坏它的分子筛结构
再问下 你们的凝胶是国产的 还是进口的
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2010-12-27 00:00:58
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ci1957
at 2010-12-26 23:59:47:
一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力 恒流泵
本文来自: 小木虫论坛 [url]http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2634154&pid=1392666&page=2# ...
问下 你们实验室的凝胶 是国产的还是进口的啊 谢谢啦
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2010-12-27 00:01:54
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lazierboy
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Originally posted by
ci1957
at 2010-12-27 00:00:58:
再问下 你们的凝胶是国产的 还是进口的
我们的凝胶是sephadex LH-20 有国产的 也有进口的
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2010-12-27 01:06:01
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