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ci1957

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】凝胶G100越走越慢~

请教
我是新人
G100 凝胶 新的 第一次用
10g干胶150ml 水溶胀
柱子1cm  1.2m
上样量200mg （5ml水稀释）
纯净水洗脱
开始大概40分钟走10ml
走了大概6 、7 管 现在越走越慢  现在1小时 才走5ml
我没有把压力开很大
可能是堵了  现在该怎么办  另外为什么会这样呢
我哪里出错了吗

[ Last edited by ci1957 on 2010-11-26 at 08:50 ]
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1楼 2010-11-25 20:00:55
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ci1957

新虫 (初入文坛)
自己顶
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2楼2010-11-25 22:00:14
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ylchen0902

金虫 (正式写手)
★
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-19 16:08:44
你的上样量有点大了，1.2的柱子上不了那么多样品的，再有就是可能你的柱子没有平衡好，胶没压实，就前面流速大后面小了
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3楼2010-12-18 14:25:36
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ci1957

新虫 (初入文坛)
为什么我看不到 我的帖子
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4楼2010-12-21 20:26:25
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ci1957 at 2010-11-25 22:00:14:
自己顶

那G100 多久10ml是正常的呢 我现在一个半小时 是不是也太长了点 到底哪里出问题了呢
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5楼2010-12-21 20:27:59
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ylchen0902 at 2010-12-18 14:25:36:
你的上样量有点大了，1.2的柱子上不了那么多样品的，再有就是可能你的柱子没有平衡好，胶没压实，就前面流速大后面小了

我现在换成了内径5cm  填料高40cm的柱子  也是1个半小时10ml  这到底是为什么呢  不应该这么慢啊
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6楼2010-12-21 20:30:58
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婉歆轩

木虫 (小有名气)
★
qinhy(金币+1):多谢指教！欢迎常来药学版！ 2010-12-22 19:45:43
你是普通的常压柱么？如果是，会不会是下面棉花塞得太紧了？
我没有用过你这个型号的凝胶，但有没有可能就是纯水的黏度太大，导致流速变慢？凝胶的洗脱剂好像很少有用纯水的。
你后来吧柱子换成内径5cm  填料高40cm的了？你不想把它当凝胶用了么？那么粗短的柱子分离效果应该不会太好了
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7楼2010-12-22 10:57:14
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 婉歆轩 at 2010-12-22 10:57:14:
你是普通的常压柱么？如果是，会不会是下面棉花塞得太紧了？
我没有用过你这个型号的凝胶，但有没有可能就是纯水的黏度太大，导致流速变慢？凝胶的洗脱剂好像很少有用纯水的。
你后来吧柱子换成内径5cm  填料高 ...

没有塞棉花下面
下面是一层膜
细长柱子一点都过不动
所以才换了短柱子
G25的 我过了 很好过
但这个G100的 装上就很慢
我也不知道为什么
我也觉得可能是水粘度太大
如果加点盐 会好点吗？
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8楼2010-12-23 09:09:06
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婉歆轩

木虫 (小有名气)
这个我就不清楚了，不好意思啦
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9楼2010-12-23 15:44:37
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)
★
chzhbin(金币+1):谢谢交流 2010-12-24 08:19:34
你加压过凝胶  肯定越来越实 越来越慢啊  一般凝胶柱是不能加压的  会破坏它的分子筛结构
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10楼2010-12-24 01:28:47
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Cpuli87

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1):谢谢参与讨论！ 2010-12-24 21:04:41
凝胶的原理就是溶胀了形成网孔，从而具有分子筛的功能，你加压应该会破坏的吧，我们实验室基本是常压过的！个人见解，不一定对！
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11楼2010-12-24 14:35:33
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lazierboy at 2010-12-24 01:28:47:
你加压过凝胶  肯定越来越实 越来越慢啊  一般凝胶柱是不能加压的  会破坏它的分子筛结构

一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力  恒流泵
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12楼2010-12-26 23:59:24
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by Cpuli87 at 2010-12-24 14:35:33:
凝胶的原理就是溶胀了形成网孔，从而具有分子筛的功能，你加压应该会破坏的吧，我们实验室基本是常压过的！个人见解，不一定对！

一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力  恒流泵
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2634154&pid=1392666&page=2#pid1392666
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13楼2010-12-26 23:59:47
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by lazierboy at 2010-12-24 01:28:47:
你加压过凝胶  肯定越来越实 越来越慢啊  一般凝胶柱是不能加压的  会破坏它的分子筛结构

再问下 你们的凝胶是国产的 还是进口的
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14楼2010-12-27 00:00:58
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ci1957

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by ci1957 at 2010-12-26 23:59:47:

一点压力都不能加吗
那怎么上洗脱液呢
我需要把洗脱液打上去啊
我现在调的是0.5的压力  恒流泵
本文来自: 小木虫论坛 [url]http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2634154&pid=1392666&page=2# ...

问下 你们实验室的凝胶 是国产的还是进口的啊  谢谢啦
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15楼2010-12-27 00:01:54
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ci1957 at 2010-12-27 00:00:58:
再问下 你们的凝胶是国产的 还是进口的

我们的凝胶是sephadex LH-20 有国产的 也有进口的
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16楼2010-12-27 01:06:01
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