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【求助/交流】关于酵母菌摇床培养被细菌污染的问题?
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| 我们生产酵母菌,原来用四层绒布封口1000ml的三角瓶(里面装250ml豆芽汁培养基),摇床培养3天,做了一个ck,不加任何菌。3天过后涂平板ck里面细菌在千万级左右,酵母菌中也有细菌。后来在培养基里面加氯霉素,细菌与酵母菌的比值在1:1000左右或以下,但酵母菌大量减少从5-10亿/ml到1-2亿/ml。最后老板买来了硅胶塞,我在实验室下做了2次实验,空白对照有:不加任何菌的带硅胶塞的三角瓶(ck0),加酵母带绒布的三角瓶(ck1,ck2,ck3);实验组:加酵母带硅胶塞的三角瓶(1,2,3)(酵母菌有3种,每个接一个三角瓶)。同等条件下培养3天,后涂平板用不加氯霉素的PDA培养基检测。检测结果:ck0(稀释一个次方):无任何菌生长;ck1,ck2,ck3:酵母菌在5亿/ml以上,细菌在500万左右;实验组1,2,3:只有酵母菌,酵母菌数2亿/ml左右。后来我们在摇床上培养酵母,接了20个三角瓶用硅胶塞。3天过后,将20个三角瓶的酵母菌液混在一起,用牛肉膏蛋白胨涂平板检测细菌在1000万以上。现在就是不知道这是怎么回事?硅胶塞应该可以阻止细菌进入三角瓶。但是那些细菌从哪儿来的呢?我前期做的2次实验用硅胶塞的都没有细菌(每次只接了3瓶),为什么接20瓶后就有了细菌呢?是操作上的问题吗? |
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