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chunmeiyang银虫 (正式写手)
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【求助/交流】磷酸盐缓冲液配制 已有7人参与
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| PBS的一般配方是磷酸二氢钾(KH2PO4)0.24g，磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.44g，氯化钠(NaCl)8.0g，氯化钾(KCl)0.2g，加水至1000mL，如果我改变氯化钠的含量，其他成分是不是要相应改变啊 |
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jhu132llh
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磷酸缓冲溶液特性：浓度变化10倍，ph值变化小于0.1。根据这个特性，可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。 或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液，边混合边测ph值，直到得到你所需要的。 磷酸盐缓冲液的配制 磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32 配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4， 配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。 用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。 磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。 其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用. pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 90.0 10.0 6.0 87.7 12.3 6.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51.0 49.0 6.9 45.0 55.0 7.0 39.0 61.0 7.1 33.0 67.0 7.2 28.0 72.0 7.3 23.0 67.0 7.4 19.0 81.0 7.5 16.0 84.0 7.6 13.0 87.0 7.7 10.5 89.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7.0 93.0 8.0 5.3 94.7 Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。 Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升. |
7楼2011-09-07 13:16:45
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