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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】磷酸盐缓冲液配制
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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】磷酸盐缓冲液配制 已有7人参与

PBS的一般配方是磷酸二氢钾(KH2PO4)0.24g，磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.44g，氯化钠(NaCl)8.0g，氯化钾(KCl)0.2g，加水至1000mL，如果我改变氯化钠的含量，其他成分是不是要相应改变啊
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1楼 2010-11-11 14:21:35
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flylove037

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-09-07 17:04:35
dhd997(金币+4, MolEPI+1): 追加 2011-09-07 17:22:52
磷酸缓冲溶液特性：浓度变化10倍，ph值变化小于0.1。根据这个特性，可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。
或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液，边混合边测ph值，直到得到你所需要的。

磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.
pH        0.2mol/L NaH2PO4(ml)        0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7        93.5        6.5
5.8        92.0        8.0
5.9        90.0        10.0
6.0        87.7        12.3
6.1        85.0        15.0
6.2        81.5        18.5
6.3        77.5        22.5
6.4        73.5        26.5
6.5        68.5        31.5
6.6        62.5        37.5
6.7        56.5        43.5
6.8        51.0        49.0
6.9        45.0        55.0
7.0        39.0        61.0
7.1        33.0        67.0
7.2        28.0        72.0
7.3        23.0        67.0
7.4        19.0        81.0
7.5        16.0        84.0
7.6        13.0        87.0
7.7        10.5        89.5
7.8        8.5        91.5
7.9        7.0        93.0
8.0        5.3        94.7




Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升.
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7楼2011-09-07 13:16:45
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-11-11 22:54:33
这个配方已经很成熟了呀
为什么要改配方那？
要改的话就是都得改，磷酸离子和氯离子的摩尔浓度还有渗透压都要注意的。
赞一下(2人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2010-11-11 15:43:07
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毛建芳

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab:需要的 2010-11-11 22:54:44
配磷酸缓冲液还要加氯化钠的吗？
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-11-11 22:20:18
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)
这个方法已经很成熟，没有必要瞎折腾，有空考虑考虑其他事情吧
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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
5楼2010-11-12 10:07:24
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