【求助/交流】磷酸盐缓冲液配制 - 分子生物 - 综合其他

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flylove037

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wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-09-07 17:04:35
dhd997(金币+4, MolEPI+1): 追加 2011-09-07 17:22:52

磷酸缓冲溶液特性：浓度变化10倍，ph值变化小于0.1。根据这个特性，可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。
或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液，边混合边测ph值，直到得到你所需要的。

磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na2HPO4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，
配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：①容易配制成各种浓度的缓冲液；②适用的pH 范围宽；③pH 受温度的影响小；④缓冲液稀释后pH 变化小，如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为：①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.
pH       0.2mol/L NaH2PO4(ml)       0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7       93.5       6.5
5.8       92.0       8.0
5.9       90.0       10.0
6.0       87.7       12.3
6.1       85.0       15.0
6.2       81.5       18.5
6.3       77.5       22.5
6.4       73.5       26.5
6.5       68.5       31.5
6.6       62.5       37.5
6.7       56.5       43.5
6.8       51.0       49.0
6.9       45.0       55.0
7.0       39.0       61.0
7.1       33.0       67.0
7.2       28.0       72.0
7.3       23.0       67.0
7.4       19.0       81.0
7.5       16.0       84.0
7.6       13.0       87.0
7.7       10.5       89.5
7.8       8.5       91.5
7.9       7.0       93.0
8.0       5.3       94.7

Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升.

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7楼2011-09-07 13:16:45

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