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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞培养污染问题
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花雨林

木虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】细胞培养污染问题

求助细胞污染解决方法:
污染表现是很碎小的黑色聚堆的东西（能想象一堆碎松针堆个圆吗），高倍镜下似乎能动（或者只是物理运动），动作幅度不大，发展较慢，出现后对细胞生长和状态看不出影响，但一旦吹散则发展迅速，污染明显，细胞死亡，培养基发黄.应该不是细菌污染。
  请问这是什么污染，可能来源哪里，怎么避免？
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[ Last edited by silicare on 2010-12-30 at 08:48 ]
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1楼 2010-11-10 17:01:48
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):辛苦 2010-11-12 09:44:05
花雨林(金币+5):谢谢！ 2010-11-12 19:41:09
污染是细胞培养中比较头疼的问题。一旦发现污染，最有效的方法是把细胞、培养基、胰酶等细胞培养用品丢掉，彻底打扫一下卫生。用新培养基复苏一只新的细胞，以后操作注意，这样是最省时省力的。费劲脑筋去除污染有时可能收不到好的效果。
看你的描述，培养基发黄，肯定是污染了，可能是细菌或霉菌。要是霉菌，培养基应该是清澈的，要是细菌培养基变浑浊。要进一步鉴定，可以用普通光学显微镜（非细胞培养的倒置显微镜）做个涂片观察一下。
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8楼2010-11-11 21:41:31
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wufengjian

木虫 (正式写手)
花雨林(金币+5):谢谢！因为同瓶培养基培养的其他细胞是好的，所以没怀疑是培养基的问题，不过也在做检菌了。另外问一句，以前见过的细菌污染发展都很快，不出两天细胞肯定死了，这次细胞长的很好，只是后期污染多了才死的，会是细菌吗？ 2010-11-11 08:57:23
感觉是细菌污染，培养一下培养基看看吧，只能是操作小心，加些抗生素了。
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2楼2010-11-10 21:41:30
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yuanzhiqin.119

至尊木虫 (著名写手)
花雨林(金币+5):谢谢！更换培养基之后污染就没了吗，我们这个很顽固啊 2010-11-11 09:01:00
之前我们这边也出现过类似的情况，培养基之类的东西，用微孔滤膜过滤下再使用，另外，还有可能是酒精灯芯的灰烬。
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3楼2010-11-10 22:10:55
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蓝天白云haha

银虫 (正式写手)
花雨林(金币+5):谢谢！单独培养细菌倒没想过，试试。 2010-11-11 20:35:04
将培养基进行空白培养看看培养基是否污染，取污点上的细菌培养确定是什么菌，或者进行染色看是否为真菌污染
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4楼2010-11-11 16:42:08
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