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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
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darkhorse928

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于millpore超滤离心管

各位大神们！请帮帮忙！我在使用millpore超滤离心管的过程中，遇到了几个问题，希望与大家交流！首先是这样 我的超滤离心管中离心后的蛋白应该怎么回收回来，离心过后是不是套管里就没有液体的，我是不是需要用buffer给它从膜上洗下来呢？如果是这种buffer应该是什么呢？是不是就是直接用枪头就去吸取呢？我的蛋白是经过镍柱纯化过的包涵体蛋白 ，里面含有8M尿素。请高人指点！使用后离心管应该怎么处理呀？
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1楼2010-11-09 21:20:26
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流，欢迎常来 2010-11-10 09:20:39
darkhorse928(金币+10): 2010-11-11 08:04:20
离心后管内是有液体的，那是水和其他物质没有被滤膜截留住的总和。

膜截留住的蛋白质最好仍溶解在液体中，因为一旦没有液体，蛋白质在离心力的作用下会贴紧滤膜，增大重新溶解的难度。
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6楼2010-11-10 00:05:05
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贺兰10

银虫 (小有名气)
共同期待高手。。。
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2楼2010-11-09 21:21:23
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ouhua

金虫 (著名写手)
★
scelab(金币+1):谢谢交流！:tiger06: 2010-11-09 23:00:46
蛋白用蛋白柱或凝胶柱回收，使用后的离心管只有洗掉了吧
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4楼2010-11-09 21:46:25
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babette

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
scelab(金币+3):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-11-09 23:00:52
darkhorse928(金币+10): 2010-11-11 08:04:13
离心后管内还是有残余液体，这样就达到浓缩效果，我以前做时没有再洗内管，也可以加少量的缓冲液洗下，缓冲液具体看你的蛋白适合哪种了。用后离心管需要浸润，可加去离子水或缓冲液（具体不记得了），主要是防止膜由于再次失水后孔径发生变化导致下次使用不能达到预期效果。
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5楼2010-11-09 21:50:05
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