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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助：Western检测转染质粒在细胞内的表达

50KD的pcDNA3.1(-)-myc重组质粒转染进细胞后用c-myc抗体进行Western检测，检测结果如图
，检测了三次都是双条带，郁闷了，虽然c-myc有内源性表达，但是也不应该在最后一个泳道出现两条呀，因为最后一个泳道的蛋白分子量只有15KD，那位高人可以给指点指点，在此谢过。
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1楼 2010-11-08 20:27:13
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by keyanhrc at 2010-11-09 11:11:05:
空对照的泳道里没有条带？
我做的一次用myc检测，也是特异性不强。有你要的条带就行。
原因可能是因为myc标签是在翻译的起始位置，蛋白中段的翻译情况就比较多了。

空对照的泳道也有条带，我的蛋白跟myc大小差不多，不好区分啊，不知道那个是我的目的条带
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3楼2010-11-09 14:15:57
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keyanhrc

新虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):谢谢分享 2010-11-09 12:34:14
shuanyu0202(金币+1):谢谢交流 2010-11-09 14:16:19
空对照的泳道里没有条带？
我做的一次用myc检测，也是特异性不强。有你要的条带就行。
原因可能是因为myc标签是在翻译的起始位置，蛋白中段的翻译情况就比较多了。
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2楼2010-11-09 11:11:05
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竹林细雨

金虫 (著名写手)
有没有这个基因的其他质粒，不带标签的，当个对照看看。如果不行，用His抗体也应该行吧。
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4楼2010-11-09 15:49:39
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wyhwawj_87

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
shuanyu0202(金币+1): 解决了，我换了细胞模型，因为原来的那个里面有myc的内源性表达 2011-05-04 08:21:37
你好 你最后这个问题解决了吗？？？
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好想好想啊 ~~~
5楼2011-05-03 10:41:01
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