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恒星年

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酶切位点重合了的两个酶的酶切问题已有2人参与

各位高手,我现在要做一个基因的克隆,上游引物只能用NcoI,下游只能用BamHI,但是在载体上这两个酶的酶切位点是重合的,切了一个另外一个就不能切了,应该怎么办啊?
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):热心鼓励。 2010-11-10 10:20:51
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-11-08 21:16:43:
请问你的同源臂是多长,用的重组酶是体外用,还是宿主体内表达的重组酶。一般原核有这么强的重组能力吗?我表示怀疑哦。

重组臂23-25bp,重组酶可以从金斯特买成品(不过比较贵哦),重组完的质粒在Top10中扩增,完全没有问题
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
13楼2010-11-10 10:11:18
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恒星年

银虫 (正式写手)

怎么没人进来啊?自己顶个先
2楼2010-11-05 18:35:08
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

恒星年(金币+1):谢谢,但是应该是有办法解决的 2010-11-05 19:03:38
估计得重新构建载体了
3楼2010-11-05 18:51:15
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hnndpt

铁虫 (正式写手)

估计得重新构建载体了
4楼2010-11-05 18:51:27
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