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郝钊

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】只加Buffer的质粒都能被切碎,这是什么原因? 已有3人参与

我这两天在构建一个检测质粒,提取质粒后酶切,发现质粒被切碎了;后来只加入Buffer也能被切碎,其他的质粒作为对照就没有问题,这是怎么回事啊?
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郝钊

金虫 (小有名气)


dhd997(金币+1):鼓励上图交流。 2010-11-06 09:40:11
其他质粒无论加Buffer,还是加酶都没有问题,说明Buffer和酶都没有问题。现在唯一的问题应该是这个质粒本身。只是不知道会是什么原因。下面是酶切图:
1marker        2 pSK1002      3pSK1002+Buffer        4pSK1002+SalI
5pUC19             6pUC19+Buffer
7pUC19+SalI                 8pUC19+MluI
   9T+EGFP                                  10T+EGFP+Buffer  11T+EGFP+Sal I
6楼2010-11-05 21:48:29
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查看全部 9 个回答

hongchenlyan

金虫 (小有名气)


郝钊(金币+1):谢谢参与
是否Buffer被酶污染了
2楼2010-11-05 09:31:45
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
郝钊(金币+1):谢谢参与
reasonspare(金币+1):好久不见了。 2010-11-05 12:00:35
Buffer被酶污染了,或被DNase污染了
漫洒英雄泪,相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行?一任俺芒鞋破钵随缘化!
3楼2010-11-05 11:07:21
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

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郝钊(金币+1):谢谢参与
郝钊(金币+1):没错,现在只可能是这个原因了。不过会有什么问题呢? 2010-11-05 21:16:12
不排除质粒自身的原因
4楼2010-11-05 11:40:29
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