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2005140303

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助】求液相高手指导

我现在做液相非常奇怪,我自己的标准样品打进去居然没有检测到峰,我现在是分析生物碱,柱子固定相主要是因为有离子作用,所以我用了缓冲液,磷酸缓冲液的浓度是50mM,样品的浓度是0.8mM,检测波长280,流动相是水:甲醇=0.06:0.14,缓冲盐做了5.5,6.5.8.1的条件,都没发现有样品吸收峰,这是为什么呢?非常困惑,求高手给点指导意见(柱子的填料是自己的装的)。

[ Last edited by 2005140303 on 2010-11-10 at 19:00 ]
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lrh1983

木虫 (正式写手)


先换一根商品化的柱子,看看是不是方法问题,如果同样方法还是没有,估计是你柱子的问题吧
2楼2010-11-05 15:38:37
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qiujm

木虫 (小有名气)

★ ★
pplover(金币+2):感谢回复! 2010-11-05 20:56:55
如果你做的是离子色谱,那你应该选含有对离子的盐溶液梯度洗脱,看你是生物碱可不可以认为在你试的几个pH条件下都是带正电荷的,这样的话你没有用盐溶液恐怕不能把样品洗脱下来吧
3楼2010-11-05 19:37:17
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杨恩慈

金虫 (初入文坛)

出现这种状况基本是两个原因,第一是柱子的问题,第二就是流动相PH值的问题,所以你可以换个柱子,或者更改下流动相的PH值,通常生物碱的话,PH值应该为碱性的,防止解离
一路走下去
4楼2010-11-06 10:26:21
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