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zoeye

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】急!有哪位前辈做过NIH3T3的转染吗 我总是转不进去。。。 已有3人参与

最近需要转NIH3T3 摸了条件查了文献
但是还没什么头绪 哪位达人转成功过呢
求指教
谢谢
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西湖鸟

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
NIH3T3有不同类型细胞的,你要做的是哪一株?NIH3T3就比较好转一些,3T3-L1难转。lipo2000我做过其他细胞的转染,死的比较多,有些细胞效率还不错,但是难转的就不太好,据说siRNA转染试剂RFect 专门针对难转染细胞的,还没用。
2楼2018-11-12 15:00:47
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cxkhhh

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
T3细胞不好养,状态不好可以通过多加一点血清,控制传代调回来的,我之前几次都是状态不好又调回来,或许也可以使用楼上提到的RFECT转染,在效果上也是可以的,能弥补不足。
3楼2019-03-29 14:47:58
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
3T3是脂肪细胞,分类型的,NIH3T3略微比3T3L1好转些。转染试验失败需要找一下原因:siRNA,转染试剂,细胞,差不多也就这几项。转染效率低要先排除一下是否是siRNA的问题,如果siRNA无效,换再好的转染试剂也白搭,可以用带荧光标记的control siRNA做一下看看,转进去的话会有荧光的。确实转染效率低,可以考虑换转染试剂,biodai的小核酸转染试剂可以试试,据说专门针对难转染细胞的,普通细胞效果更好。
4楼2019-11-18 09:00:47
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