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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于32a表达测酶活问题 已有5人参与

请问做32a融合表达,有个trx,测酶活时用不用切掉。
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lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

你最好去除。
2楼2010-11-03 16:55:28
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muchong5577

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-11-03 23:31:22
那肯定要切掉,肠激酶还不是很昂贵,不要省那点钱。
3楼2010-11-03 21:25:55
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

请问是先纯化还是先切掉trx

请问是先纯化还是先切掉trx
4楼2010-11-04 12:28:22
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muchong5577

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那要看你是用什么纯化方法啦。你是用his-tag亲和纯化吗?
5楼2010-11-05 10:20:53
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

可不可以不切直接测酶活,就是蛋白上多了个蛋白,对酶活不知道有没有影响。
6楼2010-11-05 20:36:33
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paulajjh

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我的酶也是pET32的,很多文献报道我的酶Trx对其酶活没有影响,目前还在做,具体到 你的酶有没影响,你自己需要做一下,不同酶不一样的。
7楼2011-07-15 09:08:10
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zhcosa

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
理论上,如果TRX的活性与你要测的酶活没有任何关系,那可以不切,但是要用空载体表达产物做阴性对照。

不过,建议还是切掉吧,有的审稿人对这个还是比较在意的。纯化后切掉TRX好了。
8楼2011-07-15 09:21:04
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