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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】怎么计算dNTP
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way2009way6860

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】怎么计算dNTP 已有1人参与

文献指出：25uL体系中加入1*PCR buffer, containing 10 umol
of each pair of oligomers, 0.16 mM dNTP, 2.5 U Taq polymerase, 不知到这里的0.16 mM dNTP是指dNTP总的浓度，还是指每种dNTP的浓度。谢谢
已知：在PCR反应中，dNTP应为50～200umol/L，尤其是注意4种dNTP的浓度要相等( 等摩尔配制)，如其中任何一种浓度不同于其它几种时(偏高或偏低)
，就会引起错配。浓度过低又会降低PCR产物的产量。

[ Last edited by way2009way6860 on 2010-11-1 at 20:52 ]
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GO,GO,加油!
1楼 2010-11-01 20:16:21
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蓝天白云haha

银虫 (正式写手)
way2009way6860(金币+5):谢谢 2010-11-02 20:07:32
是分开的每一种的浓度吧
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4楼2010-11-02 15:44:36
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j2

木虫 (正式写手)
买的dntp上标的有浓度啊，换算一下就是了啊
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
2楼2010-11-01 20:44:15
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way2009way6860

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by j2 at 2010-11-01 20:44:15:
买的dntp上标的有浓度啊，换算一下就是了啊

我买的是2.5mM each .我是不知道文献中说的是要总的，还是分开的。您说呢？
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GO,GO,加油!
3楼2010-11-01 20:50:51
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ben1147

木虫 (正式写手)
way2009way6860(金币+5):终于懂了 2010-11-02 21:55:37
买的是2.5mM each
终浓度是0.05~0.2mM each
一般都按最高值200uM算，dNTP的加入量是总体积的1/12.5
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5楼2010-11-02 20:54:23
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