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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Takara反转录试剂盒中oligo dT 和 random 6 mers的差别
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】Takara反转录试剂盒中oligo dT 和 random 6 mers的差别已有10人参与

做RNA反转录是选用了Takara的试剂盒，里面有两个引物，oligo 和random，这两个有什么差异。我分别做了后续试验，P出产物的条带oligo的亮度比不上random，各位虫虫知道怎么回事吗？
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不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
1楼2010-10-27 20:46:33
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ailunwen

铜虫 (初入文坛)

我也遇到了同样的疑惑

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
谢谢楼主发贴解除了我们的疑惑！
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爱知识，长智慧！
7楼2011-03-20 10:10:32
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ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-28 08:39:56
oligo(dT)只能结合到有poly(A)尾的RNA上
random可以随机结合到任何序列
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2楼2010-10-27 21:30:54
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飘在海上的雪

木虫 (正式写手)
reasonspare:不一定，oligo dT，更适合真核生物，随机引物，适用于原核生物，后者没有ｐｏｌｙＡ 2010-10-28 08:42:26
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-27 21:30:54:
oligo(dT)只能结合到有poly(A)尾的RNA上
random可以随机结合到任何序列

这样我的试验是不是选用random比较好？
赞一下(1人) 回复此楼
不在沉默中爆发，就在沉默着死亡！
3楼2010-10-27 23:21:25
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麦兜响当当

金虫 (初入文坛)

觉主
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-19 09:45:32
Random 6 mers为随机的6核苷酸引物，引物序列为5'-(P)NNNNNN-3'，其5'端和3'端均含有-OH，因此可往两端延伸，特点是产物量大，特异性差，适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有RNA的反转录反应都可使用本引物。
    Oligo dT Primer适用于具有Poly（A）Tail的RNA，因而特异性好，但因其只结合Poly A尾巴，对于较长的mRNA，经常不能延伸到5'端。（原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA以及某些种类真核生物的mRNA等不具有Poly（A）Tail）。
    两种引物可据实际情况使用一种，也可同时使用。还有一种情况，当只扩增一种目的基因时，也可以使用Specific Primer（PCR时的下游引物）作为反转录引物。
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4楼2011-03-18 22:14:54
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