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飘在海上的雪木虫 (正式写手)
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【求助/交流】Takara反转录试剂盒中oligo dT 和 random 6 mers的差别 已有10人参与
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| 做RNA反转录是选用了Takara的试剂盒，里面有两个引物，oligo 和random，这两个有什么差异。我分别做了后续试验，P出产物的条带oligo的亮度比不上random，各位虫虫知道怎么回事吗？ |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-19 09:45:32
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Random 6 mers为随机的6核苷酸引物，引物序列为5'-(P)NNNNNN-3'，其5'端和3'端均含有-OH，因此可往两端延伸，特点是产物量大，特异性差，适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有RNA的反转录反应都可使用本引物。 Oligo dT Primer适用于具有Poly（A）Tail的RNA，因而特异性好，但因其只结合Poly A尾巴，对于较长的mRNA，经常不能延伸到5'端。（原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA以及某些种类真核生物的mRNA等不具有Poly（A）Tail）。 两种引物可据实际情况使用一种，也可同时使用。还有一种情况，当只扩增一种目的基因时，也可以使用Specific Primer（PCR时的下游引物）作为反转录引物。 |
4楼2011-03-18 22:14:54
ben1147
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