24小时热门版块排行榜    

查看: 3142  |  回复: 7

忍者鸣人

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】western结果条带位置不对,是何原因? 已有5人参与

请教大家:
我做的western,有条带,但是分子量不对,比一抗说明书上面说的分子量低了50KD,请问什么原因?谢谢大家。多多帮帮啊!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tigertang

木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议加阳性/阴性对照, 可能是非特异的带
2楼2010-10-26 23:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忍者鸣人

铁杆木虫 (正式写手)

请大家帮帮忙 这个问题很困扰我啊!
3楼2010-10-27 18:49:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

happychou

新虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果是只是和目的条带差一点点,考虑是抗原漂移。如果像楼主所说的那样,差50多,我就深刻的质疑你的抗体特异性了?另外,我想问下楼主转完膜后有没有剪膜啊?是不是嫌抗体很多,呵呵
4楼2010-10-28 22:54:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忍者鸣人

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by happychou at 2010-10-28 22:54:51:
如果是只是和目的条带差一点点,考虑是抗原漂移。如果像楼主所说的那样,差50多,我就深刻的质疑你的抗体特异性了?另外,我想问下楼主转完膜后有没有剪膜啊?是不是嫌抗体很多,呵呵

哈哈 剪膜了啊 说明书上写的是130kd 我做出来的80多 唉郁闷 不懂你说的漂移啥意思
5楼2010-10-28 23:06:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宁夏8083

铁杆木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也觉得奇怪?剪膜后还会有小于目的蛋白50KD的条带?还有一种可能,就是像抗体的SDS-PAGE电泳一样,是55和25两条带,与空间结果有关,但是你的抗体是有特异性的啊,怎么会识别精度那么差?
6楼2011-01-09 23:30:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忍者鸣人

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 忍者鸣人 at 2010-10-28 23:06:16:

哈哈 剪膜了啊 说明书上写的是130kd 我做出来的80多 唉郁闷 不懂你说的漂移啥意思

这个问题 不是我一个人遇到了 我在丁香园里咨询这个问题 遇到类似问题的战友至少有三个了。
7楼2011-01-10 09:56:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫儿小

铜虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有可能在做的过程中蛋白质发生变性,可能是在处理样品的过程,例如本来100多KD的分子发生降解,生成了小分子量的,同样一抗还是能识别出来。建议在处理样品时加上蛋白酶抑制剂,仅供参考
8楼2011-01-10 14:45:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 忍者鸣人 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-13 11:11 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请(市政/环境) +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-13 04:21 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:03 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 9/450 2026-11-12 09:24 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 7/350 2026-11-12 05:41 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 9/450 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 9/450 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
信息提示
请填处理意见