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dongtianbao

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】纤维素酶分离已有2人参与

分离纤维素酶过程中,透析除盐时是否可以采用玻璃纸材质的透析袋?(玻璃纸貌似也是再生纤维素材质的,透析过程中是否会被降解掉?)各位大虾有没有分离纤维素酶的好方法?在下是一新手,望各位不吝赐教,谢谢。
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hopebiolqdhb

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-21 10:49:43
没做过纤维素酶的分离,看过资料

纤维素酶的分离纯化
普通定性滤纸浸泡于5.0/L的氢氧化钠溶液中处理30min,用蒸馏水漂洗至中性,再将其装入不锈钢过滤器中。用0.02mol/L ph4.0的醋酸钠缓冲液平衡滤纸后,上样,再分别用.02mol/L ph4.0的醋酸钠缓冲液和含0.5mol/L氯化钠的平衡缓冲液洗脱,收集高盐洗脱液。吸附及洗脱过程中平衡缓冲液流速均为1.0ml/min。洗脱液经浓缩,并用2000mL0.02mol/L ph4.5醋酸钠缓冲液透析3h-4h后,上样于用0.02mol/L ph4.5醋酸钠缓冲液平衡好的POROS 20HQ阴离子交换柱。用0-0.4mol/L氯化钠溶液线性梯度洗
脱(80min ),流速为1.0ml/min 。收集活力峰。
培养基
2楼2010-10-21 10:21:37
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-21 14:46:38
别透析了,费时得很,过G25脱盐柱一下就搞定。


纤维素酶的分离纯化也就是一般的蛋白质分离纯化,手段也是很多的,离子交换柱、疏水层析住、分子筛、亲和吸附柱之类的,文献里说了大把,楼上说的也是其中之一而已,楼主还是自己看文献去吧。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2010-10-21 at 14:21 ]
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2010-10-21 14:19:22
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