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b529941390木虫 (正式写手)
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[交流]
【原创】为什么从细胞中提取蛋白质的时候,最后一步冻干后产生了黑色物质?
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如题,HeLa细胞总蛋白质的提取,用的是标准裂解法。 在有机溶剂沉淀离心之后,先后用了丙酮和75%酒精洗涤,并分别离心。在这两部的过程中,蛋白质都是白色的沉淀物。最后用酒精洗的时候,为了防止蛋白丢失,有一些溶液没有丢弃,而是在冻干机中冻干的(以前师兄师姐都是这么做的),冻干机的温度是45℃,冻干20分钟(时间貌似有些长了.......),然后取出来的时候,发现离心管中的蛋白质有部分是黑色的,不知道这是什么原因。 冻干机的温度不是很高,我看蛋白质在这样的温度下,貌似一时半会不会变性的,即使变性了也不会是黑色的吧,然后另外的可能就是冻干机里面的东西比较多,别人的溶剂挥发过程中和我的蛋白质发生了反应,但是这种情况发生的几率很小,因为大家在冻干的东西的成分大部分都是氨水、乙腈、TFA等挥发性溶剂。 很郁闷,第一次提取蛋白质是这样..... 求解 |
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