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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】抑菌：怎样使受试菌菌液浓度相同？
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asd564244481

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】抑菌：怎样使受试菌菌液浓度相同？

我现在在做发酵，然后用经过处理的发酵液进行抑菌实验：用滤纸片法，将受试菌（大肠杆菌）溶在无菌水中制成菌液，然后涂布在培养基的表面，再在培养基上贴上吸收有发酵液的滤纸片。由于发酵批次不同，两次发酵中间隔了10几天，如何能够保证每次抑菌时受试菌的菌液浓度相同呢?希望哪位牛人能给我一些指导，详细点的，本人决不吝啬给金币！
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冰冻三尺非一日之寒，滴水穿石非一日之功！
1楼 2010-10-14 15:31:02
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带刀猎人

新虫 (小有名气)
★ ★
1949stone(金币+2):谢谢交流 够细致 2010-10-14 16:03:21
asd564244481(金币+3):谢谢 2010-10-14 16:23:39
使用麦氏比浊管校准！
0.5单位的麦氏比浊管的配置如下：取0.048mol/L的氯化钡0.5ml，加入到99.5ml的0.18mol/L的硫酸中即可。此比浊管在625nm下吸光度为0.08---0.1之间，相当于10的8此方个菌体浓度！
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2楼2010-10-14 15:59:00
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hanzhinan

木虫 (正式写手)
asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:23:32
采用显微镜计数，实在不行可以用平板计数，多做几个。滤纸片法操作简单
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3楼2010-10-22 21:06:23
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-23 11:57:32
asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:21:31
asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:23:39
先摇母液，然后再从母液里面接出来稀释相同倍数就行了，可以测个od值验证下
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4楼2010-10-23 10:51:18
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asd564244481

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by da1234mao at 2010-10-23 10:51:18:
先摇母液，然后再从母液里面接出来稀释相同倍数就行了，可以测个od值验证下

因为前后两次抑菌间隔时间比较长，我不可能用同一管母液啊？母液的菌体浓度就不一样啊！
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冰冻三尺非一日之寒，滴水穿石非一日之功！
5楼2010-10-24 13:23:13
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xuzhizhi16

铜虫 (初入文坛)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-24 15:57:12
用血球板计数吧，基本可以保证你的供试菌的浓度相同，而且比较简单。
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6楼2010-10-24 14:30:03
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-24 16:10:29
asd564244481(金币+1): 2010-10-26 10:02:27
引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-24 13:23:13:

因为前后两次抑菌间隔时间比较长，我不可能用同一管母液啊？母液的菌体浓度就不一样啊！

你不是有摇床时间温度还有接入量，在相同的情况下摇床之后取出后测定od值
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7楼2010-10-24 16:08:47
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asd564244481

铜虫 (小有名气)
★
silicare(金币+1):鼓励交流 2010-10-26 10:13:29
引用回帖:
Originally posted by da1234mao at 2010-10-24 16:08:47:

你不是有摇床时间温度还有接入量，在相同的情况下摇床之后取出后测定od值

这你就说到关键点上了，我每次的受试菌（大肠杆菌）都是用接种环挑的，这接种量怎么能保证相同呢？
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冰冻三尺非一日之寒，滴水穿石非一日之功！
8楼2010-10-26 10:05:38
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-26 10:05:38:

这你就说到关键点上了，我每次的受试菌（大肠杆菌）都是用接种环挑的，这接种量怎么能保证相同呢？

你只要摇出每次母液后就可以直接测定个od值。这个值稍稍大点，然后就是稀释至你所需要的od值就行了，然后在接菌。
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9楼2010-10-26 19:07:58
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-26 10:05:38:

这你就说到关键点上了，我每次的受试菌（大肠杆菌）都是用接种环挑的，这接种量怎么能保证相同呢？

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10楼2010-10-26 19:08:56
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