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asd564244481

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】抑菌:怎样使受试菌菌液浓度相同?

我现在在做发酵,然后用经过处理的发酵液进行抑菌实验:用滤纸片法,将受试菌(大肠杆菌)溶在无菌水中制成菌液,然后涂布在培养基的表面,再在培养基上贴上吸收有发酵液的滤纸片。由于发酵批次不同,两次发酵中间隔了10几天,如何能够保证每次抑菌时受试菌的菌液浓度相同呢?希望哪位牛人能给我一些指导,详细点的,本人决不吝啬给金币!
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冰冻三尺非一日之寒,滴水穿石非一日之功!
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带刀猎人

新虫 (小有名气)

★ ★
1949stone(金币+2):谢谢交流 够细致 2010-10-14 16:03:21
asd564244481(金币+3):谢谢 2010-10-14 16:23:39
使用麦氏比浊管校准!
0.5单位的麦氏比浊管的配置如下:取0.048mol/L的氯化钡0.5ml,加入到99.5ml的0.18mol/L的硫酸中即可。此比浊管在625nm下吸光度为0.08---0.1之间,相当于10的8此方个菌体浓度!
2楼2010-10-14 15:59:00
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hanzhinan

木虫 (正式写手)

asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:23:32
采用显微镜计数,实在不行可以用平板计数,多做几个。滤纸片法操作简单
3楼2010-10-22 21:06:23
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da1234mao

铁虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-23 11:57:32
asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:21:31
asd564244481(金币+1): 2010-10-24 13:23:39
先摇母液,然后再从母液里面接出来稀释相同倍数就行了,可以测个od值验证下
4楼2010-10-23 10:51:18
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asd564244481

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by da1234mao at 2010-10-23 10:51:18:
先摇母液,然后再从母液里面接出来稀释相同倍数就行了,可以测个od值验证下

因为前后两次抑菌间隔时间比较长,我不可能用同一管母液啊?母液的菌体浓度就不一样啊!
冰冻三尺非一日之寒,滴水穿石非一日之功!
5楼2010-10-24 13:23:13
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xuzhizhi16

铜虫 (初入文坛)


dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-24 15:57:12
用血球板计数吧,基本可以保证你的供试菌的浓度相同,而且比较简单。
6楼2010-10-24 14:30:03
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da1234mao

铁虫 (著名写手)


dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-24 16:10:29
asd564244481(金币+1): 2010-10-26 10:02:27
引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-24 13:23:13:

因为前后两次抑菌间隔时间比较长,我不可能用同一管母液啊?母液的菌体浓度就不一样啊!

你不是有摇床时间温度还有接入量,在相同的情况下摇床之后取出后测定od值
7楼2010-10-24 16:08:47
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asd564244481

铜虫 (小有名气)


silicare(金币+1):鼓励交流 2010-10-26 10:13:29
引用回帖:
Originally posted by da1234mao at 2010-10-24 16:08:47:

你不是有摇床时间温度还有接入量,在相同的情况下摇床之后取出后测定od值

这你就说到关键点上了,我每次的受试菌(大肠杆菌)都是用接种环挑的,这接种量怎么能保证相同呢?
冰冻三尺非一日之寒,滴水穿石非一日之功!
8楼2010-10-26 10:05:38
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-26 10:05:38:

这你就说到关键点上了,我每次的受试菌(大肠杆菌)都是用接种环挑的,这接种量怎么能保证相同呢?

你只要摇出每次母液后就可以直接测定个od值。这个值稍稍大点,然后就是稀释至你所需要的od值就行了,然后在接菌。
9楼2010-10-26 19:07:58
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by asd564244481 at 2010-10-26 10:05:38:

这你就说到关键点上了,我每次的受试菌(大肠杆菌)都是用接种环挑的,这接种量怎么能保证相同呢?

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10楼2010-10-26 19:08:56
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