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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【讨论】细胞骨架染色
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fyw921

铜虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】细胞骨架染色

大家好，请问大家在做细胞骨架染色（F-actin与microtube）的实验步骤？是先染微管再染f-actin，还是两者一起染啊，染色的时间大约是多久。文献上说F-actin染色为20-25min，染久了会造成很大的背景.

[ Last edited by americanyk on 2010-9-30 at 14:42 ]
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1楼 2010-09-27 16:15:57
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dj04164

木虫 (正式写手)
★ ★
americanyk(金币+2):Thank you 2010-09-30 14:42:34
fyw921(金币+4):谢谢 2010-10-04 09:16:03
嗯，没错。BSA起封闭的作用，还有用脱脂奶粉的，两个一起染的话有些困难，f-actin可以用鬼笔环肽-fitc，微管是不是要用相应的抗体？标记的时候就不能用488通道了，罗丹明？你试试看吧。同时染效果可能不太好。
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3楼2010-09-30 21:38:22
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qingbo62

木虫 (正式写手)
★
americanyk(金币+1):Thank you 2010-09-30 10:19:50
fyw921(金币+3):谢谢您！ 2010-09-30 19:21:08
fyw921(金币+3):谢谢 2010-10-04 09:15:47
F-actin 要20-25是可以的，加BSA可以减少非特异，穿膜后染可以均匀一些，穿膜时间过长的话会影响细胞形态。

至于先染后染，真不知道了。
你可以做两个片子，自己实验一下，看看哪个效果好就行了。
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2楼2010-09-30 14:08:14
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