应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Hela细胞中RNA的提取
71/1返回列表
查看: 1720  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

llxxdl620

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】Hela细胞中RNA的提取

从Hela细胞中提取RNA,利用RNA试剂盒提取，不知道每个细胞中有多少特定序列的mRNA，每个细胞中RNA的数量大约是多少呢，最终提取完后，如何知道自己提取成功了呢？能否通过跑电泳来表示呢？如果可以，那么会是多少个碱基呢？2000左右对吗？
我是个外行，望大家帮帮忙！谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-09-25 20:39:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiangfeng

金虫 (小有名气)
llxxdl620(金币+10): 2010-09-26 09:03:46
好像就是不能知道每个细胞中有多少特定序列的mRNA，每个细胞中RNA的数量大约是多少吧？
谁知道的话，愿闻其详。。

我不知道你用的是什么试剂盒。我用Trizol Reagent提取过total RNA，用甲醛变性的琼脂糖跑电泳，结果是三条明显的亮条带28S（5kb）,18S(2kb),5.8S(0.1-0.3kb),效果还不错。
建议你从网上下载TRIZOL Reagent 使用说明书，以作参考。

以上仅是个人意见。。
赞一下 回复此楼
顺势而行，问心无愧！
2楼2010-09-25 21:05:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llxxdl620

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qiangfeng at 2010-09-25 21:05:13:
好像就是不能知道每个细胞中有多少特定序列的mRNA，每个细胞中RNA的数量大约是多少吧？
谁知道的话，愿闻其详。。

我不知道你用的是什么试剂盒。我用Trizol Reagent提取过total RNA，用甲醛变性的琼脂糖跑电泳 ...

我是从天根那里订的试剂盒，我跑出来的电泳只有两条带，一个是2000kb,一个是300kb左右吧，没有5000kb的，这是不是说明我没有提出来RNA，还是说我的电泳跑的不好啊？谢谢你！
赞一下 回复此楼
3楼2010-09-26 09:06:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
llxxdl620(金币+10): 2010-09-27 08:58:22
细胞样品rna提取相对简单，trizol就能提的很好了，电泳检测完整性，然后测OD260 和280确定纯度，
赞一下 回复此楼
4楼2010-09-26 09:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by llxxdl620 at 2010-09-26 09:06:22:



我是从天根那里订的试剂盒，我跑出来的电泳只有两条带，一个是2000kb,一个是300kb左右吧，没有5000kb的，这是不是说明我没有提出来RNA，还是说我的电泳跑的不好啊？谢谢你！

可能是28s降解了，
赞一下 回复此楼
5楼2010-09-26 09:10:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

llxxdl620

金虫 (小有名气)
[quote]Originally posted by jasco at 2010-09-26 09:07:52:
细胞样品rna提取相对简单，trizol就能提的很好了，电泳检测完整性，然后测确定纯度， [/q

不好意思，我是个外行，能问一下OD260 和280是什么？有特殊的仪器吗？
赞一下 回复此楼
6楼2010-09-27 08:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
llxxdl620(金币+10): 2010-09-28 11:05:23
引用回帖:
Originally posted by llxxdl620 at 2010-09-27 08:59:19:
[quote]Originally posted by jasco at 2010-09-26 09:07:52:
细胞样品rna提取相对简单，trizol就能提的很好了，电泳检测完整性，然后测确定纯度， [/q

不好意思，我是个外行，能问一下OD260 和280是什 ...

紫外分光光度计，
测定260nm和280nm时吸光度，OD260/OD280（Ratio，R）=1.8--2.0时，认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的
赞一下 回复此楼
7楼2010-09-27 09:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 llxxdl620 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +5 angus9576 2026-08-17 9/450 2026-08-17 20:57 by ssxclkj
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭