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银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】诱导大肠杆菌产生β半乳糖苷酶要加多少乳糖 已有3人参与

如题,求助,谢谢
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jingcp200320

银虫 (小有名气)

★ ★
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看天(金币+1):应助 2010-09-25 22:18:10
自动诱导培养基里面是1L加2g乳糖
5楼2010-09-25 15:20:40
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lunababy1987

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
乳糖和IPTG是结构类似物,所以你可以实施IPTG诱导表达蛋白时的浓度看看。不知道说的有没道理。0.5mM, 或者1mM?

最好还是自己做个梯度看看结果吧,也很快的。
2楼2010-09-25 13:54:29
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lunababy1987

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+3):鼓励 分享 2010-09-25 22:17:39
不好意思,误导了。IPTG虽是乳糖的结构类似物,但是它不能被大肠杆菌利用,所以能很高效的诱导。但是乳糖不一样,乳糖会被大肠杆菌利用,所以你自己一定要摸索下合适的诱导浓度,一般我们做纤维素酶、淀粉酶的时候也加一些底物进去,从0.5%到1%不等,你可以试一试这俩改革浓度。
3楼2010-09-25 13:57:47
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

★ ★
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看天(金币+1):鼓励交流 2010-09-25 22:17:58
如果不是从成本考虑,没有必要用乳糖诱导,IPTG是最佳选择
4楼2010-09-25 14:11:05
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