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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】磷酸化蛋白western实验求助
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andia

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】磷酸化蛋白western实验求助 已有1人参与

各位好
本人要做一个蛋白和其磷酸化形式的蛋白
磷酸化的蛋白就比原蛋白多了一个磷酸基团
不知两者在SDS-PAGE胶上是不是能分开
可不可以同时用原蛋白和磷酸化的两个抗体一体杂交来做
做这个实验是不是有什么需要注意的地方
请有此实验经验的同学多提建议，谢谢大家！
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1楼 2010-09-15 10:04:30
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zhandeguo1

银虫 (小有名气)

蛋白质

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
andia(金币+2):谢谢！ 2010-09-15 10:27:05
可以考虑用适合的胶浓度和电泳时间来调节蛋白分开的程度。可以在一块胶上跑两份样，然后用不同的抗体抗，也可以进行比较。
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2楼2010-09-15 10:20:44
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dirkyoung

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很难分开的。两种办法，同样的样品跑两块胶分别敷磷酸化和总的抗体，或者先敷一种曝光后做strip敷另外一种。前面的方法省时间，后面一种方法更可靠。
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3楼2014-10-08 21:59:14
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