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冰雪灵魂木虫 (著名写手)
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【有奖活动C】征集实验达人在实验过程中总结的方法和技巧！
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[ Last edited by lovibond on 2011-10-30 at 19:34 ] |
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冰雪灵魂
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这是我这个暑期做实验过程中总结的一些实验操作，希望对大家有些帮助！ 1、实验之前一定找好自己所需要的实验器材，配好自己所需要的试剂，跟别人协商好共用实验器材的时间，防止做实验时冲突，浪费时间。再者。实验时，要时刻保持自己实验台的整洁，防止在实验时手忙脚乱。 2、配好的试剂一定要贴上标签（注明试剂名称，浓度，时间，姓名），防止混淆，另外实验出问题时，也可查到最终根源。 3、严格按照实验做好实验记录，不可涂改。实验出问题时，可以按照实验记录一步一步分析。 4、跟老师讨论实验方案时，作好记录和笔记，好记性不如烂笔头。 5、分析问题的原因。就像修均质机一样，把一个零件一个零件拆下来，然后一步一步安装，查找问题的原因所在。玉米饮料中，苦涩味的排除也一样，从最开始查找，一个工艺留一点样品，哪个环节出问题就修改哪个环节，直至问题排除。 6、阅读文献做好笔记，并且每个笔记后，标明该笔记出处，下次查找时可以省时。 7、重视实验过程每一个细节，因为每一个细节都可能导致实验的成败。 [ Last edited by 冰雪灵魂 on 2010-9-14 at 17:13 ] |
3楼2010-09-14 17:05:43
冰雪灵魂
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4楼2010-09-14 17:08:21
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5楼2010-09-14 17:10:48
感受态细胞的制备
冰雪灵魂(金币+5):谢谢分享心得感受！欢迎常来食品版块~~ 2010-09-14 17:26:43
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(1) 从37℃培养的新鲜平板上挑取E. coli JM109单菌落至3 mL LB培养基中于37℃、200 rpm培养过夜。 (2) 按1：20将培养的种子液接种至100 mL LB培养基中于37℃、200 rpm振荡培养。为得到有效转化，活细胞数不应超过108个/mL。通过测定OD600值来监测培养物的生长状况，一般OD600值约为0.4时收获细胞。 (3) 在无菌条件下，将菌悬液转移至无菌、预冷的50 mL离心管中，冰浴5 min，3,000 rpm于4℃离心10 min收集细胞。 (4) 弃上清并加入10 mL 预冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重悬细胞，冰上放置，3,000 rpm于4℃离心10 min收集细胞，弃去上清。 (5)加入10 mL 预冷的0.1 mol/L CaCl2溶液重悬细胞，冰上放置，3,000 rpm于4℃离心10 min收集细胞，弃去上清。 (6) 加入2 mL 预冷的0.1 mol/L CaCl2（含20%甘油）溶液重悬细胞，并分装于预冷的1.5 mL 离心管中，每管0.1 mL。感受态细胞存于-70℃保存或4℃放置5 h后用于转化。 |
6楼2010-09-14 17:22:41
dylanxue
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过氧化物酶活力测定
冰雪灵魂(金币+3):谢谢参与，欢迎常来食品版块~~ 2010-09-14 23:02:03
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①取两支试管，其中一支加入0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）2.7mL，1% (v/v) 邻苯二胺-乙醇溶液 0.1mL 及 0.3%（v/v）过氧化氢 0.2mL，混匀，作为待测液。 ②另外一支加入0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）2.6mL，1% (v/v) 邻苯二胺-乙醇溶液 0.1mL 及 0.3%（v/v）过氧化氢 0.2mL，然后加入 0.1mL 粗酶液，混匀，作为待测液。 ③用1cm比色皿盛装待测液立刻在 430nm测定吸光值的变化。以每分钟增加吸光值 1 的酶量为一个酶活力单位（U）。 |
7楼2010-09-14 19:54:18
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柳飞绵(金币+3):版主辛苦了 2010-09-17 19:25:45
柳飞绵(金币+3):版主辛苦了 2010-09-17 19:25:45
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1. “思考”永远是第一位的，磨刀不误砍柴工，做实验前一定要“尽可能”考虑周详，明确实验的目的、设计实验程序、预期实验结果。 2. 文章的水平与实验的“量”没什么关系，主要取决于实验的“质”。所以重在思考的深度和系统性。 3. 对“实验数据”的分析“千千万万”要及时！！！8小时的实验，如果没有15分钟的分析思考，就没有任何意义，只有思考（分析讨论）才会产生价值。 4. 控制实验“节奏”，一定要边做（实验），边想（分析数据），边学（文献参照），三者相结合，同时进行。 5. “思考”是第一位的！ 本文来自: R3579《我导师对我说的他做科研的经验体会》http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2388849 |
8楼2010-09-17 19:12:03
柳飞绵
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凯氏定氮法注意事项
冰雪灵魂(金币+4):谢谢柳飞棉斑竹支持，呵呵~~ 2010-09-17 19:25:59
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1、消化时，若样品含糖高或含脂及较多时，注意控制加热温度，以免大量泡沫喷出凯氏烧瓶，造成样品损失。可加入少量辛醇或液体石蜡，或硅消泡剂减少泡沫产生。 2、消化时应注意旋转凯氏烧瓶，将附在瓶壁上的碳粒冲下，对样品彻底消化。若样品不易消化至澄清透明，可将凯氏烧瓶中溶液冷却，加入数滴过氧化氢后，再继续加热消化至完全。 3、硼酸吸收液的温度不应超过40℃，否则氨吸收减弱，造成检测结果偏低。可把接收瓶置于冷水浴中。 4、在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10% |
9楼2010-09-17 19:25:00
10楼2010-09-17 20:04:13
