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【求助/交流】关于MTT检测淋巴细胞活性的若干问题,请教各位大侠~~ 已有8人参与
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最近在做MTT的实验,有些问题想请教各位,先谢谢大家了~~~ 另外不知道我的帖子有没有重复,但这是我自己做的实验,有自己碰到的问题,望大家帮帮小菜。。 1、染毒然后要离心去培养液,但我发现2000转并不能是细胞完全沉到板底,有些孔还是悬着?另外,大家是用什么方法除去培养液的?我发现如果直接倒或者用移液枪吸的话,都会有误差。 2、最后用酶标仪检测的波长是490nm还是570nm?参考波长是什么意思? 3、调零孔和对照孔的作用是什么?最后的结果怎么表示? 4、一般检测出来的OD值在什么范围比较可信?如果低了,是不是表示每孔加的细胞数太少了,一般一个空要多少个左右? 5、还有我的反应体积是100μL(培养基40+细胞悬液50+毒素10),有影响么?有些人用的是200μL。 6、MTT配置是,不用过滤关系大不大? [ Last edited by hcming on 2010-9-13 at 18:31 ] |
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