| 查看: 5554 | 回复: 19 | |||
| 本帖产生 1 个 ACI ，点击这里进行查看 | |||
[交流]
【求助】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？（这次图可以看到了） 已有13人参与
|
|||
|
我用HPLC来分离多肽，用的柱子是C18 第一张图的流动相是： A：H20（含0.1%TFA） B：乙腈（不含TFA） 第二和三张图的流动相是： A：H20（含0.1%TFA） B：乙腈（含0.1%TFA） 洗脱条件均为： A（%） B（%） 0min 95 5 10min 95 5 60min 0 100 70min 0 100 流速为1ml/min； 其中：第一张图与第二、三张图是分别在不同的地方走了，用的柱子也不同。 第三张图走的是制备型的C18，但是柱子材料和第二张图的完全一样。 那请问大家，为什么当我的目标峰出现后，基线总是会飘移呢？而且还是B中未加TFA的向下飘，加了TFA的向上漂，什么原因呢？那要怎么做才能抑制基线漂移呢？ 另外，为什么走制备型的C18，我的目标峰会变成波浪状的山包呢？ 谢谢！！！ 图（1）乙腈中未加TFA  图（2）乙腈中加了TFA  图（3）制备型C18，流动相条件和柱子填料与（2）图相同，乙腈中加了TFA  |
回复此楼» 猜你喜欢
磺酰氟产物，毕不了业了！
已经有4人回复
-
论文终于录用啦！满足毕业条件了
已经有16人回复
-
求个博导看看
已经有19人回复
-
投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球
已经有8人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 液相的基线一直波动是怎么回事
已经有9人回复
- 液相色谱 跑基线，没有进样 发现问题！怎么办才好？？
已经有9人回复
- 液相色谱分析物质 基线出现问题了。。
已经有5人回复
- 高效液相基线波动
已经有8人回复
- 为什么液相色谱基线严重漂移？
已经有18人回复
- 液相色谱基线出现波浪，如何解决？
已经有14人回复
- 关于高效液相色谱法基线波动和基线漂移等引发因素的一些小结
已经有75人回复
- 进样之后，高效液相色谱图上的压力色谱基线都不见了，且色谱图在offline上也没有？
已经有9人回复
- 【求助】液相色谱基线很不稳定，漂移比较严重！怎么解决？
已经有3人回复
- 【求助】液相色谱基线问题，请教！
已经有13人回复
- 【求助】液相色谱 基线出现问题了？
已经有4人回复
- 【求助/交流】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？（现在可以看到图了）
已经有11人回复
- 【求助】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？
已经有3人回复
- 【求助】液相色谱-流动注射联用时，走基线时成脉冲式的曲线，原因是什么呢？
已经有7人回复
- 【求助】液相色谱基线总是向下降是怎么回事？
已经有18人回复
happy169
木虫 (著名写手)
冰王子蜜
- ACI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 贵宾: 2.757
- 金币: 4392.5
- 散金: 396
- 帖子: 2390
- 在线: 76.7小时
- 虫号: 445499
- 注册: 2007-10-28
- 专业: 色谱分析
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+3, ACI+1):很详细，呵呵，辛苦了，长期应助解答，奖励ACI ^-^ 2010-09-14 23:21:20
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
opq691(金币+3, ACI+1):很详细，呵呵，辛苦了，长期应助解答，奖励ACI ^-^ 2010-09-14 23:21:20
|
首先，我认为用梯度洗脱，基线飘逸还是正常的，看你的图猜测你用的是安捷伦仪器（手动积分有标识），为什么出了目标峰才漂移，这个想不明白，考虑会不会是巧合！ 第二个问题，向上飘还是向下飘取决于在进样瞬间仪器所采集的基线信号强度决定，我认为当10分钟开始之前，基线采集的是95:5强度，0.1%TFA，前者一直是0.1%TFA,的混合，混合后TFA浓度应该低于0.1%（无TFA乙腈的加入），而后者是已经溶解了TFA的乙腈，TFA浓度始终维持在0.1%，TFA的紫外吸收导致上漂！ 第三个问题，是不是考虑色谱柱的柱效问题， |
2楼2010-09-11 16:16:12
jiamingw
金虫 (小有名气)
- ACI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1447.8
- 帖子: 189
- 在线: 15.4小时
- 虫号: 184515
- 注册: 2006-02-14
- 专业: 药物化学
10楼2010-09-13 13:03:38
luomuwuhen
金虫 (著名写手)
- ACI: 1
- 应助: 318 (大学生)
- 金币: 425.8
- 散金: 2134
- 红花: 33
- 帖子: 2539
- 在线: 620.4小时
- 虫号: 770047
- 注册: 2009-05-14
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
3楼2010-09-11 16:29:33
xkp123
木虫 (著名写手)
- ACI: 1
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2301.1
- 红花: 3
- 帖子: 1119
- 在线: 448.4小时
- 虫号: 896825
- 注册: 2009-11-08
- 性别: GG
- 专业: 聚合物共混与复合材料
4楼2010-09-11 16:49:46
5楼2010-09-11 18:15:56
xkp123
木虫 (著名写手)
- ACI: 1
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2301.1
- 红花: 3
- 帖子: 1119
- 在线: 448.4小时
- 虫号: 896825
- 注册: 2009-11-08
- 性别: GG
- 专业: 聚合物共混与复合材料
6楼2010-09-11 18:42:37
7楼2010-09-11 19:59:36
8楼2010-09-12 11:17:23
ajshen
木虫 (小有名气)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 2116.4
- 散金: 9
- 红花: 3
- 帖子: 241
- 在线: 143.8小时
- 虫号: 846529
- 注册: 2009-09-12
- 性别: MM
- 专业: 色谱分析
9楼2010-09-13 11:26:10