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【求助/交流】我走高效液相色谱的基线为什么会这样？（现在可以看到图了） 已有8人参与
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我用HPLC来分离多肽，用的柱子是C18 第一张图的流动相是： A：H20（含0.1%TFA） B：乙腈（不含TFA） 第二和三张图的流动相是： A：H20（含0.1%TFA） B：乙腈（含0.1%TFA） 洗脱条件均为： A（%） B（%） 0min 95 5 10min 95 5 60min 0 100 70min 0 100 流速为1ml/min； 其中：第一张图与第二、三张图是分别在不同的地方走了，用的柱子也不同。 第三张图走的是制备型的C18，但是柱子材料和第二张图的完全一样。 那请问大家，为什么当我的目标峰出现后，基线总是会飘移呢？而且还是B中未加TFA的向下飘，加了TFA的向上漂，什么原因呢？那要怎么做才能抑制基线漂移呢？ 另外，为什么走制备型的C18，我的目标峰会变成波浪状的山包呢？ 谢谢！！！ （1）乙腈中未加TFA  （2）乙腈中加了TFA  （3）制备型C18，流动相条件和柱子填料与（2）图相同，乙腈中加了TFA [ Last edited by xukun1176 on 2010-9-11 at 14:54 ] |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):鼓励积极解答的童鞋~ 2010-09-13 09:21:23
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制备型每次都这样？做了几次？仔细看了几遍图，还是感觉像是样品没进到柱子里，吸收值都太低了，因为在分析柱中，样品吸收值和水峰差不多，但是制备型里峰没有一个有和水峰同样的吸收值，要么就是你的样品不纯被拖成了N多个物质（可能性不大）要么就是样品没进到柱子或是还没洗脱出来。。。而且制备型的基线漂移也还好，范围只是20以内。。。 液相上只是大体看看峰型来判断样品纯度。。如果是单峰而且对称性比较好的话，可以初步判定是纯品了。。不过最好是进一步通过核磁和质谱进行鉴定。 基线漂移无解。。同求高手解答。。 |
7楼2010-09-13 07:48:16
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