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hopebiolqdhb

金虫 (著名写手)

[交流] 【分享】培养醋酸菌的培养基 已有6人参与

1.醋酸菌斜面培养基:葡萄糖 1克,酵母膏1克,碳酸钙1克,琼脂2.5克,水100毫升
2.斜面培养斜面制作:培养基按配方调配好(碳酸钙先不加入),分装试管,灭菌备用。碳酸钙按比例分装、灭菌。摆斜面前将培养基和碳酸钙混合,用手搓均匀,然后摆斜面,备用
3.  Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)
Glucose (葡萄糖) 100g
Yeasst extract (酵母膏) 10g
CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g
Distilled water (蒸馏水) 1000ml
Adjust (调) pH to 6.8
适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种
3.1 斜面培养基  
葡萄糖8g,酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5,分装试管。0.IMPa灭菌20min。95%酒精(食用级)40mL。摆斜面,
3.2 液体增殖培养基  
葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。
3.3 醋酸菌种的制备  
扩大培养过程:安瓿管,液体试管1.液体试管2,100mL三角瓶,500mL三角瓶,1000mL三角瓶,种子罐。
3.3.1 安瓿管开启:酒精棉球擦抹三次,用重器撞击,打开,注入0.5mL无菌水,将菌球溶解,全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内,30℃培养72h,每2h摇动—次
3.3.2 菌体生长:培养基变混浊后,颜色变浅,对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液,30℃培养48h,每2h摇动—次。
3.3.3 三角瓶三级扩培,三角瓶中培养基的装量为50%,每级按种量在10%左右,在转换振荡器上恒温培养,培养温度均为30℃,时间依次缩短为36、36、24h,
3.3.4 种子罐培养基同前 配料后种子罐夹套加热灭菌100℃保持15min,冷却后,先加入4%食用酒精,无菌操作接入菌种。接种量为10%~12%,温度保持在30℃±1℃,通无菌空气,菌体生长时间为24~36h.视菌体生长情况及镜检结果而定
3.3.5 每次接种前,先将菌种进行外观观察 。有异样情况者,作涂片、染色、镜检观察,菌体生长不正常或染菌的三角瓶不得使用。外观正常者抽检2—3个样品,在确保菌株纯度、无污染的情况下转入下一级菌种扩培。培养醋酸菌时,需要用含糖或酵母膏(维生素B)的培养基,在肉汤蛋白胨培养基上生长不良。大多数菌株可用六碳糖和甘油作为碳源,对甘露醇和葡萄糖酸盐很少能利用或不能利用,不分解乳糖、糊精和淀粉。醋酸菌不形成芽孢,一般为形态近于球菌的短杆菌。醋酸菌可在PH4.3以下繁殖,增殖时多在液面成膜。幼龄细胞呈G-,老龄细胞呈可变性,因而染色只用来作为鉴定时的参考因素。醋酸菌增殖时生成挥发性酸臭。感官判断类似于一种丁香成分,和纯醋酸的嗅感不同。防止方法不外呼改善工厂的环境卫生,加强卫生管理什么的。但是它也是很好控制的:1好气性菌,尽可能降低密封容器的溶解氧(效果明显)2.降低PH值基本无效。3.污染主要在5,6月份发生。4.与容器有关,塑料容器要比玻璃瓶容易感染,可能与塑料容器的透氧性有关。5.醋酸菌不形成芽孢,故耐热性不强,65℃5~10分钟即可杀死。所以综合来看醋酸菌不是很难控制的。
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培养基
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人痴我狂

铜虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我现在正在培养醋酸菌,想对培养液中的菌群浓度做计数,就是明确(或者粗略)得出单位体积溶液里菌株的数量。请问大侠有什么简单有效的方法吗?
我查阅的资料里有提及用梯度菌液平板涂布法,太这个方法工作量太大,用时太长,所以我想请教一下还有没有像酵母菌血球计数板计数之类的简单的方法。
难得癫狂~~~
6楼2015-03-25 14:27:38
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danphoenix

金虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
培养基这么多,选哪个呢?
努力做好自己!
3楼2013-09-24 11:42:23
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musie

金虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
碳酸钙会沉淀在斜面底部是怎么回事???求助
4楼2014-03-12 19:05:20
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Micro_pan

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)里应该用什么调节PH到6.8呢,还有应该在灭菌前调节好吗?谢啦。
7楼2018-01-10 19:28:51
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