24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 1313  |  回复: 7

在雨中

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】有谁用过bioteke的RT-PCR premixture?我怎么连标线都做不好呢?已有2人参与

RT. 有哪位虫友用过百泰克的RT-PCR premixture?质量怎么样?
最近我一直用百泰克的2倍SYBR Real-time PCR Premixture做绝对定量的标准曲线.效果很差.梯度稀释为10^8至10^2基因拷贝数.标准曲线在10^8至10^5次之间标准曲线拟合的还算可以,R2为0.992,但4次到3次方之间的点就非常差劲了.Ct值基本在16-22之间变动.几乎不能检测更低的拷贝数的标准品.
别人用我的定量PCR仪都蛮好的,Ct值可以到30多都没有问题.为什么我的就不行?是不是百泰克的RT-PCR premixture质量有问题?导致无法测定较低浓度的模板?还是有其他原因.请各位虫友帮忙.BB奉送!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

关键的还得看你每个点的重复情况
2楼2010-09-07 16:54:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-09-07 16:54:26:
关键的还得看你每个点的重复情况

每个点的平行都很好.几乎没有差异.
请您再次指点哈!
3楼2010-09-08 10:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

在雨中(金币+1):标线已经做好了,是我的质粒没有做好.谢谢您,斑斑大人.给您20BB好像有点不舍得 2010-10-05 17:08:22
在雨中(金币+19):呵呵 2010-10-05 17:08:37
变动是什么意思,那就把图发上来看看吧

要不把对应的表格发上来也行
4楼2010-09-08 12:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljx2ljx

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主最后做的怎样啊,我现在也在做这个,也是标准曲线做不好,怎么办?
5楼2013-07-22 11:32:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
5楼: Originally posted by ljx2ljx at 2013-07-22 11:32:58
楼主最后做的怎样啊,我现在也在做这个,也是标准曲线做不好,怎么办?

如果做细菌总基因的定量PCR,建议不要用百态克的普通定量pcr mix
6楼2013-07-22 21:52:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhhj2011

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by ljx2ljx at 2013-07-22 11:32:58
楼主最后做的怎样啊,我现在也在做这个,也是标准曲线做不好,怎么办?

请问你现在做的怎么样了,我也是标准曲线建立不好!
7楼2015-06-03 15:54:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

在雨中

金虫 (著名写手)


引用回帖:
7楼: Originally posted by jhhj2011 at 2015-06-03 15:54:44
请问你现在做的怎么样了,我也是标准曲线建立不好!...

换了别的,没用这个玩意了。
8楼2015-06-04 16:10:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 在雨中 的主题更新
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见