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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】有谁用过bioteke的RT-PCR premixture?我怎么连标线都做不好呢?
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在雨中

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】有谁用过bioteke的RT-PCR premixture?我怎么连标线都做不好呢? 已有2人参与

RT. 有哪位虫友用过百泰克的RT-PCR premixture?质量怎么样?
最近我一直用百泰克的2倍SYBR Real-time PCR Premixture做绝对定量的标准曲线.效果很差.梯度稀释为10^8至10^2基因拷贝数.标准曲线在10^8至10^5次之间标准曲线拟合的还算可以,R2为0.992,但4次到3次方之间的点就非常差劲了.Ct值基本在16-22之间变动.几乎不能检测更低的拷贝数的标准品.
别人用我的定量PCR仪都蛮好的,Ct值可以到30多都没有问题.为什么我的就不行?是不是百泰克的RT-PCR premixture质量有问题?导致无法测定较低浓度的模板?还是有其他原因.请各位虫友帮忙.BB奉送!
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1楼 2010-09-07 15:16:34
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主
关键的还得看你每个点的重复情况
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2楼2010-09-07 16:54:26
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-09-07 16:54:26:
关键的还得看你每个点的重复情况

每个点的平行都很好.几乎没有差异.
请您再次指点哈!
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3楼2010-09-08 10:55:00
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silicare

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优秀版主
在雨中(金币+1):标线已经做好了,是我的质粒没有做好.谢谢您,斑斑大人.给您20BB好像有点不舍得 2010-10-05 17:08:22
在雨中(金币+19):呵呵 2010-10-05 17:08:37
变动是什么意思，那就把图发上来看看吧

要不把对应的表格发上来也行
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4楼2010-09-08 12:31:09
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ljx2ljx

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主最后做的怎样啊，我现在也在做这个，也是标准曲线做不好，怎么办？
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5楼2013-07-22 11:32:58
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ljx2ljx at 2013-07-22 11:32:58
楼主最后做的怎样啊，我现在也在做这个，也是标准曲线做不好，怎么办？

如果做细菌总基因的定量PCR，建议不要用百态克的普通定量pcr mix
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6楼2013-07-22 21:52:31
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jhhj2011

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by ljx2ljx at 2013-07-22 11:32:58
楼主最后做的怎样啊，我现在也在做这个，也是标准曲线做不好，怎么办？

请问你现在做的怎么样了，我也是标准曲线建立不好！
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7楼2015-06-03 15:54:44
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jhhj2011 at 2015-06-03 15:54:44
请问你现在做的怎么样了，我也是标准曲线建立不好！...

换了别的，没用这个玩意了。
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8楼2015-06-04 16:10:22
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