24小时热门版块排行榜    

查看: 3541  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

mzlfengye

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助细胞支架材料的灭菌及细胞向支架材料上的接种方法

求助求助!细胞支架材料大家都用什么方法灭菌啊?具体步骤是什么?还有就是细胞往支架材料上接种是怎么进行的?一般多长时间就可以看到细胞有没有接种上去啊?我采用75%酒精灭菌,接种后培养36h后发现,培养液变黄、混浊,用倒置显微镜也看不到支架上有没有细胞啊?不过感觉好像没有哦!这到底是怎么回事啊?是污染了吗?怎么支架上会没有一点点细胞呢,我接种量挺大的。而且,换液后,发现培养液中有许多小沫沫,好像是支架被分解的,具体我也搞不清楚。另外,我用的是蛋白支架,这种支架Biomaterials上好多文献都有报道的。但我的怎么会出现这样的情况,着急啊!请各位大侠帮帮忙!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongchao

新虫 (小有名气)

★
mzlfengye(金币+1):谢谢啊! 2010-09-14 09:43:04
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 22:10:25
钴60照射灭菌较好,只有灭菌好并且培养环境好才可以考虑细胞的生长问题.否则染菌后一切只有重新开始.
7楼2010-09-13 09:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

kaobochiren

木虫 (著名写手)

★
americanyk(金币+1):Thank you 2010-09-07 08:09:48
mzlfengye(金币+1):我是把材料泡在酒精里消毒后,又在PBS中泡着,在净化台的紫外灯下辐照杀菌的啊! 2010-09-07 15:10:57
从你描述的情况看应该是杀菌不好!被污染了!酒精的杀菌效果是有限的,不能做到完全杀菌!比较好的方法有高温杀菌,紫外杀菌。如果材料性质允许你可以用紫外杀菌2h,效果会好一些!
2楼2010-09-07 14:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wwgfz

铁杆木虫 (著名写手)

★
mzlfengye(金币+1):谢谢你,不过我的支架制备过程应该还好,主要是不清楚75%酒精泡30min后紫外2h能达到无菌吗? 2010-09-09 18:28:37
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 22:10:53
你的结果上看,肯定是染菌了。

呵呵,你要更具体点,什么蛋白支架。你的蛋白支架可以泡酒精而不变形?可以采用环氧乙烷吗?文献中如果都是采用酒精灭菌的话,你可以尝试在制备支架的时候,把蛋白溶液过滤,把交联剂也过滤,然后可能会好一点。
3楼2010-09-09 11:54:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aegeansyang

银虫 (正式写手)

★
mzlfengye(金币+1):谢谢你啊! 2010-09-10 13:49:45
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 22:10:47
首先肯定是污染了,如果肉眼看到浑浊的话,显微镜下应该看到蠕动的菌;细胞估计是全部死亡了,细菌感染后,细胞完全被裂解了。所以你看不到细胞。

灭菌的话,紫外照射加乙醇浸泡

如果要观察细胞的话,一般接种1-2小时后观察一下,细胞应该贴附了。但是,由于你用的是支架材料,表面不平的话,一般显微镜也难以观察到细胞。可以做个简单的荧光染色,在荧光显微镜下观察。
4楼2010-09-10 09:28:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见