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mzlfengye

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助细胞支架材料的灭菌及细胞向支架材料上的接种方法

求助求助!细胞支架材料大家都用什么方法灭菌啊?具体步骤是什么?还有就是细胞往支架材料上接种是怎么进行的?一般多长时间就可以看到细胞有没有接种上去啊?我采用75%酒精灭菌,接种后培养36h后发现,培养液变黄、混浊,用倒置显微镜也看不到支架上有没有细胞啊?不过感觉好像没有哦!这到底是怎么回事啊?是污染了吗?怎么支架上会没有一点点细胞呢,我接种量挺大的。而且,换液后,发现培养液中有许多小沫沫,好像是支架被分解的,具体我也搞不清楚。另外,我用的是蛋白支架,这种支架Biomaterials上好多文献都有报道的。但我的怎么会出现这样的情况,着急啊!请各位大侠帮帮忙!
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wwgfz

铁杆木虫 (著名写手)


mzlfengye(金币+1):谢谢你,不过我的支架制备过程应该还好,主要是不清楚75%酒精泡30min后紫外2h能达到无菌吗? 2010-09-09 18:28:37
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论 2010-09-20 22:10:53
你的结果上看,肯定是染菌了。

呵呵,你要更具体点,什么蛋白支架。你的蛋白支架可以泡酒精而不变形?可以采用环氧乙烷吗?文献中如果都是采用酒精灭菌的话,你可以尝试在制备支架的时候,把蛋白溶液过滤,把交联剂也过滤,然后可能会好一点。
3楼2010-09-09 11:54:53
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