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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为何我的蛋白纯化出来后有三条带?

请问各位做过蛋白纯化的同仁:我纯化的蛋白为何洗脱出来的是三条带?应该是100KD左右的一条才对,这是什么原因?难道是被打断了?另外这三条带都比100KD小~而加起来的总和又不100KD大

[ Last edited by zhshch2009 on 2010-9-2 at 10:21 ]
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-09-03 15:23:16
silicare(金币+3):热心~ 2010-09-06 12:24:39
his-tag是否GE的柱子本质一样,AKTA只是个仪器,不能决定纯化效果,还会有杂带正常,运气好的才有可能一次就得到单条带,一步纯化即使是亲和层析也难说的。

我现在的这个酶在粗蛋白里含量太少,在活性胶里有活性但看不到明显的蛋白质条带,不知道楼主有没有可能是这个情况。

看起来楼主根本不打算把事情说清楚,没有提供足够细节,看起来应该是问题已经解决了。睡觉去。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
21楼2010-09-03 14:40:54
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

另外这三条带都比100KD小~
2楼2010-09-02 10:15:28
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yaojc

木虫 (正式写手)

zhshch2009(金币+1): 2010-09-02 10:29:35
是不是分解了,你是电泳检测的吗?

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]
专注、专心、专业
3楼2010-09-02 10:17:28
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-09-02 10:17:28:
是不是分解了,你是电泳检测的吗?

[ Last edited by yaojc on 2010-9-2 at 10:19 ]

对的,跑的SDS-PGAE,可是我不明白如果分解了的话为什么三条带加起来大小不等于应有大小呢?
4楼2010-09-02 10:29:23
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