| 查看: 2806 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】求助：液相 反相色谱柱问题？ 已有10人参与
|
|||
|
条件：1.C18的反相色谱柱，分析处理甲基丙烯酸酯（MMA），样品中还含有极微量的乙酰半胱氨酸，采用甲醇和水作流动相，样品均溶解在纯水中。每次测样很多，大概有80来个吧。 2 每次操作也都是将流动相过滤超声后使用。用完后，用5%的甲醇冲洗半小时，再用纯乙晴冲洗一个小时。 3 因为只是分析甲基丙烯酸酯，标样也就配制了不同浓度的甲基丙烯酸脂。 问题：第一次实验开始用的是新柱子，先做标样MMA，出的峰很漂亮，时间也一致。开始测两样品的时候，出封时间随着测量样品时间的增加，慢慢的会从8min增加到9min。但是峰型还是很尖。 第二次测试，同样的步骤，但是封出现拖尾，出封时间从9min后移至11min。 第三次测试，出封在10min，并且基线波动非常大，以至于根本就不能够用了。。 测试的仪器没有控温柱，我怀疑是温度的原因。因为这几天室内温度一只在降低。我只是对MMA进行定量的分析，晚一点点出封，只要和标样时间一致我就觉得可以用的。不知道这样可以不？ 关于封拖尾，我觉得是测试时间太长，导致柱效降低。因为第二次试验结束，马上就得第三次实验，我就用5%的甲醇冲洗半小时，再用纯乙晴冲洗一个小时。到第三次实验的时候，峰型图的基线波动十分大的话，我想柱子是不是已经失效了。 我现在想让色谱柱再生。我看了很多再生的资料，都是因为有缓冲盐作流动相后柱子的处理，我样品不含缓冲盐，那么我怎么冲洗改进下更好呢。。。希望大家指点下。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
人气不行了
已经有9人回复
-
没有任何消息-是不是就凉了
已经有6人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有5人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有21人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有16人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有21人回复
-
估计是周四
已经有4人回复
-
我面上完蛋了
已经有9人回复
-
范进中举一文的中心思想
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求教关于液相色谱柱的问题
已经有10人回复
- 【求助】一物质液相色谱检测问题
已经有48人回复
- 【求助】安捷伦液相压力问题
已经有30人回复
- 【求助】液相常见问题及解决方案
已经有6人回复
- 【求助】液相色谱柱反冲后还能否使用？
已经有22人回复
- 【求助】液相色谱出峰时间的问题
已经有8人回复
- 【求助】液相色谱出峰顺序问题？谢谢！
已经有4人回复
- 【求助】液相 出峰出现问题？
已经有4人回复
- 【求助】色谱柱冲洗压力的问题
已经有11人回复
- 【求助】高效液相色谱的有关问题
已经有16人回复
- 【求助】液相色谱柱子的种类及选择色谱柱的方法?
已经有13人回复
|
甲基丙烯酸酯这东西在水中的溶解度好吗？样品的基质是否复杂，如果复杂，最好加一保护柱，还有一次性做这么多样，后面的样是不是都在下半夜进样了，昼夜温差大吗？ 关于溶解度，我计算过，在我样品测试的范围内事全部溶解的。 样品成分不复杂，第一次测试的时候，出峰还是很干净，分析得很清楚的。 但是后来估计是柱子效果下降，峰很乱，基线也不平了。 昼夜温差有1度，我觉得出峰时间后延和温度有一定关系。但是我只需要确定样品出峰在哪，用面积定量就好了，样品多也得连着测完。  我每次使用前，流动相都会走一个多小时平衡的。。。 开始测量标准样的时候，基线还是很平的，一到测样品就波动大了。 不过第一次用新柱的时候就用乙腈充了两个小时，再用流动相甲醇和水平衡了一个小时用的。第一次测的时候，样品并没有出现拖尾，以后出现拖尾的话，应该不是没有分离开，估计是柱效降低了吧？ |
7楼2010-08-31 21:05:46
2楼2010-08-31 15:29:30
luomuwuhen
金虫 (著名写手)
- ACI: 1
- 应助: 318 (大学生)
- 金币: 425.8
- 散金: 2134
- 红花: 33
- 帖子: 2539
- 在线: 620.4小时
- 虫号: 770047
- 注册: 2009-05-14
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pplover(金币+1):感谢参与！ 2010-08-31 21:35:18
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pplover(金币+1):感谢参与！ 2010-08-31 21:35:18
| 不知道你用的啥比例的甲醇和水，保留时间漂移一般是温度的影响，楼主说的峰拖尾估计是有没分离好的组分和主峰重叠。如果流动相里没有缓冲盐只是甲醇和水，用完的话直接用纯甲醇冲掉就可以了，不用先用5%的甲醇冲柱子。再生反相柱子的话，建议楼主用异丙醇反冲柱子过夜即可，流速控制在0.5ml以下。不过按你的说法，是新柱子应该不会是柱子问题。还有，新柱子刚用的时候最好先用甲醇或者乙腈小流速冲半天活化一下，如果上来就用大比例的水相来冲，很容易把固定相冲塌。 |
3楼2010-08-31 15:35:42
jane291
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1743.8
- 散金: 3
- 帖子: 94
- 在线: 181.5小时
- 虫号: 454047
- 注册: 2007-11-07
- 性别: MM
- 专业: 药物分析
4楼2010-08-31 15:39:58
