应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】100金币求助各位一个HPLC的具体问题。
532/6返回列表上一页123456下一页
查看: 4479  |  回复: 52
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zff7673

银虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:30
你可以在反应液中加点标准品，确定那个是目标峰，流动相用缓冲盐试试看
赞一下 回复此楼
11楼2010-08-27 13:39:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:34
不是超载，这两个峰其实就是一个，对映体不可能是的，就你这流动相条件不可能使对引体分叉，手性拆分也没那么容易，真是对映体的话这种峰3天就可以拆开，而且可以发非常好的杂志文章，但是明显不是对映体或异构体，

个人观点，这两个峰是一个峰，柱子不好，或者流动相条件不合适，或者溶剂效应，都会把好好的一个峰跑成这样，应该是一个东西
赞一下 回复此楼
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
12楼2010-08-27 13:44:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicilyok

新虫 (初入文坛)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:38
哇 图和我的好一样哦 不过之前我的是标准品跑出来全都是双峰 主要是柱效的原因 更改流动相比例以后有明显改善 样品还没有重新试过 不知道对你的实验是否有帮助 持续关注
赞一下 回复此楼
13楼2010-08-27 13:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

883475

银虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:41
whynotbest(金币+4): 2010-08-27 16:07:00
楼主不是专业做研发分析的吧
首先，你的方法就是不成熟的，看你的流动相甲醇：水=65：35，进标品时主峰出峰时间7.8分钟，保留时间还是比较短的。
你可以走梯度：甲醇：水=15：85   0-5min
                                          80：20   20-35min
流速1.0ml/min
水相的pH可以调节一下，看你样品的性质，如果有酚羟基、羧基等酸性基团，可以用磷酸盐调节成pH3左右的buffer，如有碱性基团反之；

如果梯度洗脱后，图一中的两个峰荏苒没有明显的分离，那就真的要考虑是不是异构体之类的了，看你的产物结构中是否有烯的结构？是否有手性中心？
如果是烯的顺反异构的话，建议你换正相，用硅胶柱试试，当然，如果有手性柱的话，可以直接用手性柱来分离试试
赞一下 回复此楼
14楼2010-08-27 14:34:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiusjiu

木虫 (正式写手)
whynotbest(金币+1): 2010-08-27 16:03:45
个人观点，如果流动相条件一样的话，那么第一个谱图两个峰不是一个物质，我想溶剂效应不会单单影响要检测的物质，这也太巧了。13楼上说的采用梯度或者换柱子就可以证明这个是不是溶剂效应造成的
赞一下 回复此楼
15楼2010-08-27 14:44:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangezai

铜虫 (小有名气)
两个物质在里面
回复此楼
16楼2010-08-27 16:05:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sangezai

铜虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-28 19:35:31
不好意思，说错了，没金币给的
赞一下 回复此楼
17楼2010-08-27 16:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫
引用回帖:
Originally posted by 冰岛猎人 at 2010-08-27 13:37:06:
我的意思是你用的反应液造成的 你反应得到的母液如果没有提纯 直接进样就会发生溶剂效应  不知道你溶解标准品的溶剂和反应液中的溶剂是否一样

小弟确实是用没有经过任何处理的反应液直接进样的，会是溶剂效应吗？
赞一下 回复此楼
WorkFinishPublish
18楼2010-08-27 16:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whynotbest

至尊木虫 (职业作家)

淫虫
引用回帖:
Originally posted by 883475 at 2010-08-27 14:34:07:
楼主不是专业做研发分析的吧
首先，你的方法就是不成熟的，看你的流动相甲醇：水=65：35，进标品时主峰出峰时间7.8分钟，保留时间还是比较短的。
你可以走梯度：甲醇：水=15：85   0-5min
                    ...

谢谢这位兄台
小弟确实不是药分专业的，HPLC纯属外行，呵呵
那么多少保留时间是比较合适的呢
小弟的东西是钠盐，极性挺大的，溶剂是甲醇。
赞一下 回复此楼
WorkFinishPublish
19楼2010-08-27 16:11:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

883475

银虫 (小有名气)
whynotbest(金币+1): 2010-08-28 19:35:42
引用回帖:
Originally posted by whynotbest at 2010-08-27 16:11:00:



谢谢这位兄台
小弟确实不是药分专业的，HPLC纯属外行，呵呵
那么多少保留时间是比较合适的呢
小弟的东西是钠盐，极性挺大的，溶剂是甲醇。

15-20分钟一般是比较合适的保留时间，当然也要看具体情况，如果保留时间长了以后峰展宽严重，那方法还是需要调整～
你说你的产物是钠盐，那水相最好还是用buffer吧，效果会好一些，看你贴的两张图，峰前峰后都不是很漂亮，方法改善的余地还很大

[ Last edited by 883475 on 2010-8-27 at 16:19 ]
赞一下 回复此楼
20楼2010-08-27 16:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 whynotbest 的主题更新
532/6返回列表上一页123456下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[基金申请] 同样的基金本子，换个专家直接从C变A！ +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[基金申请] 别被青基扩招骗了！26年科研内卷才刚刚开始 +3 国自然国社科中 2026-05-14 4/200 2026-05-19 08:48 by archvillain
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +8 1234567wang 2026-05-17 10/500 2026-05-18 18:52 by zzahkj
[基金申请] 今年审到国自然15份，谈谈感受 +16 国自然国社科中 2026-05-17 16/800 2026-05-18 14:58 by gy116024
[硕博家园] 考博自荐 +5 科研狗111 2026-05-13 6/300 2026-05-18 11:22 by 糊糊涂涂好
[基金申请] 重磅！青年科学基金项目（C类）资助增幅预计超过50% +7 水和泥不是水泥 2026-05-13 10/500 2026-05-18 07:50 by 水和泥不是水泥
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 v9tggjlwd0 2026-05-15 4/200 2026-05-17 08:06 by 11n4dfd8yn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 7hlccowb3h 2026-05-15 4/200 2026-05-17 07:46 by 11n4dfd8yn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cjf4bx70cj 2026-05-14 7/350 2026-05-17 06:55 by 11n4dfd8yn
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k37jurhrau 2026-05-16 3/150 2026-05-17 01:37 by ue3ir18jc3
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k37jurhrau 2026-05-16 3/150 2026-05-17 01:25 by ue3ir18jc3
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-17 00:35 by ue3ir18jc3
[高分子] 本人最近太闲了，谁有问题可以提，每天会统一回复 +9 一切都是空工 2026-05-12 20/1000 2026-05-16 19:52 by Equinoxhua
[有机交流] 求助2，4-二氯-5-嘧啶甲醛的合成方法 20+3 光吃不拉 2026-05-14 6/300 2026-05-16 19:46 by Equinoxhua
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 5/250 2026-05-16 16:20 by czyzsu
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-16 11:29 by h3oerqvkv9
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
[文学芳草园] 风把牡丹吹跑了 +5 myrtle 2026-05-12 9/450 2026-05-15 15:27 by myrtle
[教师之家] 教学课件你会给同学吗 +8 硕士研究生吗 2026-05-13 8/400 2026-05-14 22:23 by 常规沥青
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭