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xing1789

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于昆虫细胞方面的知识,谢谢给些建议。。。

想请教几个问题:
一:昆虫细胞表达载体,pfastbacI和pfastBAcdua,这两个表达载体可以连接多大的目的片段l(最大能多大).
二:在提取重组杆粒的时候除了用手提提取之外,是否可以用Kit提取?如果可以用什么样的Kit?什么厂家?
三:用手提提取重组杆粒的时候,加完P1,P2,P3,离心之后上清液用无水乙醇沉淀杆粒和异丙醇沉淀杆粒哪个效果更好一些?怎样增加杆粒的纯度?减少蛋白的含量?
四:在做转染的时候细胞为什么没有变化?感染72小时细胞没有protocol说的那样细胞出现停止生长,膨胀等现象。是否可以说明在做转染的时候没有做好?病毒的毒力不高导致这种现象?
五:做转染的时候最好用那种转染试剂?


本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2329220&fpage=1
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