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chendarid0

银虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】实时荧光定量pcr的问题已有4人参与

请各位高手帮帮忙啊
我是做丙硫咪唑对家蚕微孢子虫β微管蛋白基因抑制作用的，我有对照，添毒微孢子虫的和添毒微孢子虫后又加丙硫咪唑处理的这三种不同的处理方式，取三种不同组织，六个不同时段，以β-actin为内参基因，来研究待测基因β微管蛋白基因的基因表达差异，每个pcr管做3次重复，那么我需要设计多少种组合在96孔荧光定量pcr仪种应该怎样排列呢谢谢

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三人行必有我师

1楼 2010-08-20 16:42:44

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chendarid0

银虫 (初入文坛)

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谢谢这位高手回答还有问题请教

引用回帖:

Originally posted by hulqi at 2010-08-21 16:13:39:
抑制剂是单独使用吧？有没有组合的情况？没有的话你可以按时段做，做6次，每次有9个样，每个样对应一个内参，中间放标曲。

请问你这里面A-I样品是待测目的基因的，下面6-8行是上面样品一一对应的内参基因。J列对照是阴性对照，无模板的，其下面6-8行是一一对应阴性对照相应的内参基因，是吗？而且我可以不用分时段，分组织，想做几个就做几个，只要按照你这目的基因对应内参基因的原则就可以，是吗？还有我是用2-△△ct法来测的，不用标准曲线，那可以A4-j4空白，是吗？
谢谢这位高手指点，请回答好吗？