24小时热门版块排行榜    

查看: 3072  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何做定点突变已有4人参与

比如我有一段序列(序列本身很长,只把需要做点突变附近的序列给大家):CGAGGTCGAGAATTCTCACTACCCGGGGTCGACCTCGAGC,如何把序列中红色的C突变成T呢?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸方面

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sabrina9786

木虫 (小有名气)

★ ★
看天(金币+2):鼓励回答 2010-08-21 01:21:20
空谷幽风(金币+1): 2010-08-21 15:40:39
这个很简单啊,你只要设计包括突变位点的重叠引物,然后结合上下游引物扩出两边片段,再分别回收左右两端,然后放在一起进行PCR就可得到全长的带有突变位点的基因。

当然不知道你说的序列很长是不是不容易扩出全长?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2010-08-19 12:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

空谷幽风

金虫 (正式写手)

没人知道吗?自己顶!
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-08-19 11:57:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★
看天(金币+2):鼓励 2010-08-21 01:21:28
空谷幽风(金币+1): 2010-08-21 15:40:58
如果已经构建在质粒上,可以通过设计突变引物扩增,然后使用Dpn I,切除野生型质粒。转化克隆菌株。

如果是线性的相对麻烦一些。需要同时设计突变点的突变引物和片段上下游的引物,两者搭配扩增,产生左右两端,然后使用近似重叠PCR的方法将两个片段连接起来。
4楼2010-08-19 13:16:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xpp666666

铁虫 (小有名气)


看天(金币+1):鼓励 2010-08-21 01:21:37
空谷幽风(金币+1): 2010-08-21 15:41:03
赛百盛的点突变试剂盒 ,拿来用一下就搞定了 还挺好用的
5楼2010-08-19 13:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 请问大家,我有希望进浙大普博么 +5 高艺文 2024-09-28 8/400 2024-09-29 00:08 by 小红豆
[硕博家园] 希望有师兄师姐帮忙引荐申博 +6 zhanyaqian 2024-09-25 11/550 2024-09-28 22:24 by 自强2019
[硕博家园] 毕业论文的数据能否再发小论文 +6 20081002 2024-09-28 7/350 2024-09-28 22:20 by 鱼翔浅底1
[教师之家] 东南大学电气学院电力电子方向招收硕士博士 +4 蜡笔小鑫1989 2024-09-26 7/350 2024-09-28 21:16 by 伍文童
[教师之家] 开心!国庆前发个小财~ +15 zjjxzh 2024-09-26 15/750 2024-09-28 19:54 by bear2007
[论文投稿] 求推荐医学类杂志 35+4 wshxtim1 2024-09-25 4/200 2024-09-28 13:56 by Wormaciae
[教师之家] 西湖大学教授:我可以自由地选择讲课的方式, 讲授的角度 +4 zju2000 2024-09-22 4/200 2024-09-28 09:40 by bio-polymer
[考博] 材料/电信/生物-2025普博生自荐-985本双非硕一区一作 +4 enowei0127 2024-09-23 8/400 2024-09-27 22:40 by enowei0127
[论文投稿] Journal of colloid and interface science期刊 10+4 1821588220 2024-09-24 10/500 2024-09-27 20:37 by 1821588220
[育儿交流] 熊孩子睡觉前很多事,啥原因? +7 quan2153 2024-09-25 14/700 2024-09-27 16:46 by quan2153
[硕博家园] 当前读博士还有性价比吗? +8 苏东坡二世 2024-09-23 8/400 2024-09-27 11:39 by 半生梦君
[考博] 数学博导 +4 学术霸王 2024-09-25 6/300 2024-09-27 11:14 by 青古
[有机交流] 二氯甲烷的去除 +3 cgsa吧 2024-09-24 8/400 2024-09-27 10:55 by bear2007
[考博] 电催化,电池方向学生自荐 30+3 Freelancedd 2024-09-24 10/500 2024-09-27 10:27 by 莱茵润色
[论文投稿] 期刊论文发表了但查询到sci未收录 50+5 yibuxiao 2024-09-25 11/550 2024-09-27 10:24 by 莱茵润色
[论文投稿] 为什么审稿人一直拒绝审稿啊? +7 潇湘雪月 2024-09-24 13/650 2024-09-27 07:53 by weizhi111
[基金申请] 请教2024后期资助到哪个阶段了 +3 拾光者5566 2024-09-23 8/400 2024-09-26 09:27 by 拾光者5566
[论文投稿] NC投稿多久有消息呀? +4 Jordanblood 2024-09-24 6/300 2024-09-25 16:58 by FZX_2024
[有机交流] chemdraw结构式复制到word变形 +5 笑看人生1993 2024-09-22 11/550 2024-09-25 14:44 by 冰蓝夜游神
[论文投稿] 爱斯维尔旗下Postharvest Biology and Technology,采用什么系统查查 20+4 sdsdsxh 2024-09-22 9/450 2024-09-25 07:33 by sdsdsxh
信息提示
请填处理意见