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【求助/交流】转化时平板涂布后要放多久?
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oyanxuelai
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[交流]
【求助/交流】转化时平板涂布后要放多久?
已有12人参与
转化时平板涂布后要放多久?
转化时,取200ul转化后的菌液在平板上涂布,要等五分钟还是十分钟?菌液干了,会不会影响转化后细菌的生长?我做转化后,不长菌,不知道是什么原因,请各位虫友们指点迷津!非常感谢!
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1楼
2010-08-19 10:47:47
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oyanxuelai
银虫
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专业: 微生物生理与生物化学
非常感谢!我那菌液是,5ulPCR产物酶切后的+100ul感受态细菌,进行转化后,再加600ul无抗生素的液态培养基.正对照长得很多,负对照没有长,就是实验组的不长
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4楼
2010-08-19 11:07:34
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空谷幽风
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看天(金币+1):鼓励回答 2010-08-19 16:04:33
200ul不太容易涂干吧,可以4900r/min离心5min后倒掉一部分上清,吹打混匀后涂板,涂完后可立刻放到培养箱,板子干了不影响结果
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼
2010-08-19 10:59:55
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wjswj
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专业: 生物大分子结构与功能
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小木虫(金币
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要看对照实验的…………
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3楼
2010-08-19 11:01:48
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专业: 神经分子细胞生物学
【求助/交流】转化时平板涂布后要放多久?
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小木虫(金币
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看天(金币+3):鼓励新人交流 2010-08-19 16:04:51
要看你用的平板。要是用的平板已经配了很久了,你涂得量也不多,涂完菌,就会干,就可倒置培养!要是最近一两天才配的,可能就要等等了,要是涂完后,一直不干的话,就正放平板,过夜培养,影响也不会很大!
转化后,不长菌,这个原因就多了,得看你转化的是什么,要是连接片段转化的话,没长菌,可能是没连接上。也许是平板抗性不对,或许是做转化过程中出了问题!
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我期望自己能有一个大的转变!!!!
5楼
2010-08-19 11:07:51
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