Originally posted by richenim at 2010-12-30 00:12:51:
有两个问题要请教下LZ哦，
1、我去做流式，用长春新碱做阳性对照（10ppm，给药24h），但是结果测出来是我的药物的凋亡率不到1%，而且长春新碱的凋亡率才3%，检测的老师说细胞的状态很好，染料也染上了，我不知道 ...

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-30 11:37:10:


第一个问题：
1、首先考查自己的模型是否已经建立好。通过染Hoechst，是否得到比较高的凋亡率（视野中，凋亡细胞/总细胞）
2、制备样品的时候是否注意规范的操作？比如：有没有收集上清中的凋亡细胞？用原培 ...

Originally posted by richenim at 2010-12-30 16:28:19:


1. 之前用Hoechst染了的，凋亡率差不多30%左右吧，后来一直用的吖啶橙染色的。
2.收集了上清，消化时没有加EDTA哦，但没加BSA，检测的老师说不用加所以我就没加，样品制备应该没问题吧，检测的老师说样品几乎 ...

Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-30 17:13:45:


反正我们用凯基的就做不出来东西，可能是货物批次间不稳定吧…………

空泡的图片我没有……网上搜应该能搜到

凋亡通路不是你想做什么通路就做什么，要实事求是，看看在你的模型中到底是什么机制……

Originally posted by richenim at 2010-12-30 17:23:35:

你说的那个进口的凋亡试剂盒多少钱啊？
我的先导化合物主要是线粒体凋亡通路，所以我自己合成的化合物想探讨线粒体凋亡通路机制哦

Originally posted by wangdandelia at 2010-12-30 17:51:36:
我也要举手提问。
我做的是质粒载体与21bp的核苷酸序列重组。
我的质粒是4kb，单酶切后klenow补平，然后去磷酸化；
短DNA片段是人工合成的多聚核苷酸序列，退火，然后磷酸化，与去磷酸化的载体相连。
但是，转 ...