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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


看天(金币+1):呵呵 2010-12-04 22:56:05
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Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 11:41:24:

那就是还得自己买PI与RNA酶喽。

是的~用起来挺好的
而且这些PI还可以用于普通的细胞染色。所以一次我们配个200ml放冰箱,可以用很久
171楼2010-12-04 12:37:44
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dhd997

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-04 12:37:44:


是的~用起来挺好的
而且这些PI还可以用于普通的细胞染色。所以一次我们配个200ml放冰箱,可以用很久

能说下具体怎么配的吗?借鉴一下,PI不就是染色吗
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
172楼2010-12-04 14:49:41
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 14:49:41:

能说下具体怎么配的吗?借鉴一下,PI不就是染色吗

这个我得去翻翻……忘记扔哪里去了
173楼2010-12-04 17:56:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
rainwander(金币+2):鼓励积极参与交流~ 2010-12-07 14:08:46
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Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 14:49:41:

能说下具体怎么配的吗?借鉴一下,PI不就是染色吗

PI染色工作液配方(溶剂为超纯水):
PI        RNase A        柠檬酸钠        NaF        溶液总量
5mg        400KU        100mg        0.03g        100ml

工作液终浓度:
PI:50μg/ml
RNase A:4KU/ml
NaF:0.3mg/ml(防腐剂,可不加)
柠檬酸钠:1mg/ml



----------------------
嗯,找到了~我们实验室的protocol
174楼2010-12-07 11:27:14
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dhd997

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-07 11:27:14:


PI染色工作液配方(溶剂为超纯水):
PI        RNase A        柠檬酸钠        NaF        溶液总量
5mg        400KU        100mg        0.03g        100ml

工作液终浓度:
PI:50μg/ml
RNase A:4KU/ml
NaF:0.3mg/ml(防腐剂,可不加)
柠檬酸钠:1m ...

不太适合我。依旧谢过!
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
175楼2010-12-07 14:54:01
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

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Originally posted by dhd997 at 2010-12-07 14:54:01:

不太适合我。依旧谢过!

怎么会不适合?这不就是通用的么……
176楼2010-12-07 17:38:26
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dhd997

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Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-07 17:38:26:


怎么会不适合?这不就是通用的么……

一言难尽
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
177楼2010-12-07 18:35:31
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j2

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
强人,请教一个问题:用primer express3设计的引物和把该引物BLAST出的TM值差别很大,有十多度。请问该如何是好?多谢~
修炼ing,当虫仙……
178楼2010-12-07 18:51:47
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


dhd997(金币+1):good 2010-12-20 21:40:51
引用回帖:
Originally posted by j2 at 2010-12-07 18:51:47:
强人,请教一个问题:用primer express3设计的引物和把该引物BLAST出的TM值差别很大,有十多度。请问该如何是好?多谢~

按引物合成单上,50mM Na+的Tm加上5~10度甚至更多即可
如果做实时定量,可以加多点,做克隆,加少点
179楼2010-12-07 23:28:20
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j2

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-07 23:28:20:


按引物合成单上,50mM Na+的Tm加上5~10度甚至更多即可
如果做实时定量,可以加多点,做克隆,加少点

十方感谢!
修炼ing,当虫仙……
180楼2010-12-08 11:44:11
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