应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】-三磷酸腺苷-答疑专帖，我也来玩~~
21217/22返回列表首页上一页151617181920下一页末页
查看: 3935  |  回复: 211
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-11-06 09:38:19
引用回帖:
Originally posted by hnndpt at 2010-11-05 16:33:20:
RAPD-PCR loci showing decreased and increased intensities in tumor tissue DNA relative to control DNA indicate that loci have undergone allelic losses and gains, respectively



allelic losses  ...

decreased and increased intensities
变亮了，说明模板增多了，所以就是等位基因获得咯~~~就是DNA拷贝数增加
当然，这个是不大精确的判断
可以做个什么核型研究，看看到底是哪个座位有问题，然后再进一步研究
赞一下(1人) 回复此楼
161楼2010-11-06 00:03:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
请问一下，PI单染的时候。乙醇固定，要把细胞剧烈混匀吗？比如漩涡没事吧？
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
162楼2010-12-04 10:31:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-12-04 11:24:29
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 10:31:14:
请问一下，PI单染的时候。乙醇固定，要把细胞剧烈混匀吗？比如漩涡没事吧？

是做流式？
不行，要温柔，不然细胞会碎的~
加了乙醇，细胞就很脆弱很脆弱了
比如1.5ml的细胞悬液，我都是用200ul的中枪轻柔混匀的，这样做出来的曲线拟合得非常好，而且没有碎片峰
赞一下(1人) 回复此楼
163楼2010-12-04 11:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-04 11:22:28:


是做流式？
不行，要温柔，不然细胞会碎的~
加了乙醇，细胞就很脆弱很脆弱了
比如1.5ml的细胞悬液，我都是用200ul的中枪轻柔混匀的，这样做出来的曲线拟合得非常好，而且没有碎片峰

是流式。轻轻的能混匀吗？我感觉用自己的PBS清洗应该也可以吧，试剂盒的buffer太不够用了
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
164楼2010-12-04 11:24:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-04 11:33:25
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 11:24:09:

是流式。轻轻的能混匀吗？我感觉用自己的PBS清洗应该也可以吧，试剂盒的buffer太不够用了

buffer？神马来的？

---------------我们实验室的protocol------------------

流式细胞术测细胞周期样品制备

1、        消化细胞，用完全培养基重悬，并用中枪充分吹打成单细胞悬液。
2、        1000~1500rpm离心5min，弃尽上清，加500ul PBS轻柔重悬。
3、        缓慢加入1.5ml无水乙醇，边加边摇匀。
4、        置4℃固定过夜。
5、        同法离心，去除乙醇。避光条件下加500ul PI染液重悬，移入流式管。
赞一下(1人) 回复此楼
165楼2010-12-04 11:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-04 11:27:49:


buffer？神马来的？

---------------我们实验室的protocol------------------

流式细胞术测细胞周期样品制备

1、        消化细胞，用完全培养基重悬，并用中枪充分吹打成单细胞悬液。
2、        1000~1500rpm离 ...

我晕，实验步骤超级不一样啊。我用的凯基的试剂盒。
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
166楼2010-12-04 11:32:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
silicare(金币+2):你可以开一个流式的专贴 2010-12-08 12:35:00
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 11:32:35:

我晕，实验步骤超级不一样啊。我用的凯基的试剂盒。

我们都是自己配的，protocol也是经过优化的，做出来的图超级漂亮~不需要试剂盒
赞一下(1人) 回复此楼
167楼2010-12-04 11:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-04 11:36:09:


我们都是自己配的，protocol也是经过优化的，做出来的图超级漂亮~不需要试剂盒

你们加入500ul  PI是不是太恐怖了？我加5ul也还可以啊。
赞一下 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
168楼2010-12-04 11:38:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-04 11:38:13:

你们加入500ul  PI是不是太恐怖了？我加5ul也还可以啊。

那个500ul是稀释过的溶液，同时里头也含有RNase
赞一下 回复此楼
169楼2010-12-04 11:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-04 11:40:16:


那个500ul是稀释过的溶液，同时里头也含有RNase

那就是还得自己买PI与RNA酶喽。
赞一下 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
170楼2010-12-04 11:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 三磷酸腺苷 的主题更新
21217/22返回列表首页上一页151617181920下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 269求调剂 +11 啊啊我我 2026-04-07 11/550 2026-04-11 16:45 by vgtyfty
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 化学工程调剂289 +43 yang婷 2026-04-07 49/2450 2026-04-11 10:37 by 紫曦紫棋
[考研] 求调剂 +10 翩翩一书生 2026-04-09 10/500 2026-04-11 09:32 by 益达核桃露
[硕博家园] 0856材料化工求调剂，一志愿211，初试成绩349 +5 江淮北月 2026-04-05 5/250 2026-04-10 16:26 by 高维春
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 材料工程302分求调剂 +18 zyx上岸！ 2026-04-04 18/900 2026-04-10 10:07 by 314126402
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学， +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 材料调剂 +17 小刘同学吖吖 2026-04-06 18/900 2026-04-07 11:41 by 诗与自由
[考研] 085100建筑学 寻求跨专业调剂 一志愿南大294分 校级省级国家级奖项若干 踏实肯干 +3 1021075758 2026-04-06 4/200 2026-04-07 09:23 by 蓝云思雨
[考研] 材料工程310专硕调剂 +14 捞捞我…. 2026-04-04 15/750 2026-04-06 14:18 by lqwchd
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +5 baiiyu 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:35 by 啵啵啵0119
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 5/250 2026-04-05 15:52 by jndximd
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:08 by 啵啵啵0119
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭