应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【分享】-三磷酸腺苷-答疑专帖，我也来玩~~
21215/22返回列表首页上一页131415161718下一页末页
查看: 3935  |  回复: 211
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
1949stone(金币+3):够意思 2010-10-16 19:12:56
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-10-13 08:38:11:

增值，凋亡。

细胞增殖，假设没有凋亡发生，那么就应该好好用流式测下周期改变，看要研究周期的哪个部分
凋亡，分两块来看，一类是周期依赖的，一类是非周期依赖的

你做实验的话，最简单的，发现有所谓的viability的改变的话（MTT），就应该踩几个时间点去看下周期有没有明显的变化。同时也看看有没有细胞的死亡（Hoechst 33342/PI）
等这些明确了再计划后面的事情
赞一下(1人) 回复此楼
141楼2010-10-13 12:46:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-13 12:46:58:


细胞增殖，假设没有凋亡发生，那么就应该好好用流式测下周期改变，看要研究周期的哪个部分
凋亡，分两块来看，一类是周期依赖的，一类是非周期依赖的

你做实验的话，最简单的，发现有所谓的viability的改 ...

这些搞定了，再说。
回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
142楼2010-10-13 13:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
老大做过Caspase 9与3吗？有什么经验之谈吗？还有ladder。
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
143楼2010-10-13 16:19:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-10-13 16:19:03:
老大做过Caspase 9与3吗？有什么经验之谈吗？还有ladder。

Cas-3、9用promega的荧光试剂盒
ladder不好做，试过一次，失败
反正有其他指标，所以我不做了
赞一下 回复此楼
144楼2010-10-13 17:39:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

181587941

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-10-13 22:57:44
我想问一个问题，我们通过比赤酵母表达外源蛋白，但是硫酸铵无法沉淀，通过观察，有以下几个现象：
一，摇瓶培养可以沉淀下来，但是发酵罐发酵就不会沉淀。
二，硫酸铵浓度足够，甚至达到饱和都无法沉淀。
三，不要怀疑蛋白浓度不够，我们换乙醇沉淀方法后，发现蛋白浓度大的惊人，占了瓶子的三分之一高度。
四，加80%硫酸铵后，溶液变的很稠，就是不沉淀。
赞一下(2人) 回复此楼
145楼2010-10-13 21:11:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
scelab(金币+2):hoho 2010-10-13 22:57:39
引用回帖:
Originally posted by 181587941 at 2010-10-13 21:11:16:
我想问一个问题，我们通过比赤酵母表达外源蛋白，但是硫酸铵无法沉淀，通过观察，有以下几个现象：
一，摇瓶培养可以沉淀下来，但是发酵罐发酵就不会沉淀。
二，硫酸铵浓度足够，甚至达到饱和都无法沉淀。
三， ...

这个问题难倒我了，毕竟我不是做蛋白纯化的
提点建议吧
沉淀的时候温度如何？可以尝试提高到40℃以上，当然前提是蛋白不会变性
实在不行的话，用其他的方法沉淀吧~~
赞一下(1人) 回复此楼
146楼2010-10-13 21:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-13 17:39:58:


Cas-3、9用promega的荧光试剂盒
ladder不好做，试过一次，失败
反正有其他指标，所以我不做了

你做什么指标？
回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
147楼2010-10-13 21:24:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-10-13 21:24:59:

你做什么指标？

Hoechst
Cas-3，9
Annexin V/PI
赞一下 回复此楼
148楼2010-10-13 21:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-10-13 21:39:05:


Hoechst
Cas-3，9
Annexin V/PI

3,9不是光度的吗？有经验之谈没？
赞一下(1人) 回复此楼
人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
149楼2010-10-13 21:40:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流。 2010-10-13 21:44:37
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-10-13 21:40:18:

3,9不是光度的吗？有经验之谈没？

换液换少点，比如60ul左右，等到实验当天，试剂就可以少加点了（比如只需50，推荐的是100，不过没差……），一个试剂盒当两个用

（那个检测试剂是要和培养基体积1:1加的）
赞一下(1人) 回复此楼
150楼2010-10-13 21:42:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 三磷酸腺苷 的主题更新
21215/22返回列表首页上一页131415161718下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程281还有调剂机会吗 +12 xaw. 2026-04-11 12/600 2026-04-11 18:31 by wutongshun
[考研] 一志愿厦大0856，306求调剂 +10 Bblinging 2026-04-11 10/500 2026-04-11 16:59 by zchychina
[考研] 308求调剂 +3 VvvvL 2026-04-10 3/150 2026-04-11 15:32 by xiangxu
[考研] 280求调剂 +8 wzzz王 2026-04-09 8/400 2026-04-11 11:56 by zhq0425
[考研] 269求调剂 +8 跪求收留。 2026-04-04 8/400 2026-04-11 10:50 by zhq0425
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 307求调剂 +8 tzq94092 2026-04-10 8/400 2026-04-10 17:33 by 286640313
[考研] 一志愿京区985，085401电子信息，本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[考研] 085800 能源动力求调剂 +6 阿biu啊啊啊啊啊 2026-04-10 6/300 2026-04-10 15:03 by hemengdong
[考研] 调剂 +19 不逢春 2026-04-05 20/1000 2026-04-10 10:15 by may_新宇
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂，对材料和化学方向也感兴趣 +8 无情的小羊 2026-04-09 9/450 2026-04-10 09:30 by 松花缸1201
[考研] 本科郑州大学，一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 一志愿武理车辆 281 求调剂 +5 上岸研究生. 2026-04-07 5/250 2026-04-09 15:56 by only周
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 312求调剂 +4 Say Never 2026-04-04 4/200 2026-04-08 08:41 by barlinike
[考研] 286求调剂 +20 Faune 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 11:33 by 诗与自由
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭