应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】求助：液相 吸光度很低 怎么回事？
91/1返回列表
查看: 1457  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

whutxd5

[交流] 【求助】求助：液相 吸光度很低 怎么回事？ 已有5人参与

大家帮我看看，我做的类黄酮的HPLC，吸光度很低，不知道这样做出的各化合物的分离度和样品的浓度是否合适，谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-09 11:51:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13073456851

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:25
富集吧
如果信噪比到不了10以上，你是没办法定量的。
另外，依你目前的图看，方法不是很成熟，在下些功夫开发方法吧
赞一下(2人) 回复此楼
子非鱼，焉知鱼之乐？
2楼2010-08-09 12:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by 13073456851 at 2010-08-09 12:12:27:
富集吧
如果信噪比到不了10以上，你是没办法定量的。
另外，依你目前的图看，方法不是很成熟，在下些功夫开发方法吧

20-40分钟内出现的几个峰都是我想要的

20-40分钟内的峰，方法学考察肯定要做，我想先按照文献上的方法做好液相条件，再做液质联用，确定了物质之后再买标品进行定量
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-10 00:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:31
两种可能:1、上液相的样品浓度太低；2、没有选择样品的最佳吸收波长。类黄酮我记得好像是278nm，不晓得lz用的检测波长是多少。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-08-10 06:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlie524

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:36
我也在做黄酮的液相，交流下~
你的检测波长是多少啊？另外你用的是制备型还是分析型？你上样的浓度是多少？
貌似我也出现过你这样的情况~并且，我的样品峰比较多，最后结束的时候回出现基线上漂~~~~有啥意见交流下？
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-10 08:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

色谱工作者

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:42
流动相的选择是否合适、波长选择是否合适？
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-08-10 09:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by charlie524 at 2010-08-10 08:59:25:
我也在做黄酮的液相，交流下~
你的检测波长是多少啊？另外你用的是制备型还是分析型？你上样的浓度是多少？
貌似我也出现过你这样的情况~并且，我的样品峰比较多，最后结束的时候回出现基线上漂~~~~有啥意见交流 ...

样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰


是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-12 00:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by xiaoxiao7239 at 2010-08-10 06:44:03:
两种可能:1、上液相的样品浓度太低；2、没有选择样品的最佳吸收波长。类黄酮我记得好像是278nm，不晓得lz用的检测波长是多少。

样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰


是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。
赞一下 回复此楼
8楼2010-08-12 00:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlie524

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by whutxd5 at 2010-08-12 00:27:05:



样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最 ...

我的信号强度跟你的也差不多~~~你用甲酸水？还是甲醇水？另外，你黄酮的溶解性好吗？进样量是多少？还有你的样品原料是啥？物质咋吗？我的峰的分离度不是很好~~~有时都凑在一起
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-08-12 08:59:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 whutxd5 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 求调剂 +5 yunziaaaaa 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:57 by ccp273206157
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:53 by ccp273206157
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭