应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】求助：液相 吸光度很低 怎么回事？
91/1返回列表
查看: 1523  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

whutxd5

[交流] 【求助】求助：液相 吸光度很低 怎么回事？ 已有5人参与

大家帮我看看，我做的类黄酮的HPLC，吸光度很低，不知道这样做出的各化合物的分离度和样品的浓度是否合适，谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-09 11:51:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13073456851

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:25
富集吧
如果信噪比到不了10以上，你是没办法定量的。
另外，依你目前的图看，方法不是很成熟，在下些功夫开发方法吧
赞一下(2人) 回复此楼
子非鱼，焉知鱼之乐？
2楼2010-08-09 12:12:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by 13073456851 at 2010-08-09 12:12:27:
富集吧
如果信噪比到不了10以上，你是没办法定量的。
另外，依你目前的图看，方法不是很成熟，在下些功夫开发方法吧

20-40分钟内出现的几个峰都是我想要的

20-40分钟内的峰，方法学考察肯定要做，我想先按照文献上的方法做好液相条件，再做液质联用，确定了物质之后再买标品进行定量
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-10 00:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:31
两种可能:1、上液相的样品浓度太低；2、没有选择样品的最佳吸收波长。类黄酮我记得好像是278nm，不晓得lz用的检测波长是多少。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-08-10 06:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlie524

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:36
我也在做黄酮的液相，交流下~
你的检测波长是多少啊？另外你用的是制备型还是分析型？你上样的浓度是多少？
貌似我也出现过你这样的情况~并且，我的样品峰比较多，最后结束的时候回出现基线上漂~~~~有啥意见交流下？
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-08-10 08:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

色谱工作者

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-08-10 11:15:42
流动相的选择是否合适、波长选择是否合适？
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-08-10 09:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by charlie524 at 2010-08-10 08:59:25:
我也在做黄酮的液相，交流下~
你的检测波长是多少啊？另外你用的是制备型还是分析型？你上样的浓度是多少？
貌似我也出现过你这样的情况~并且，我的样品峰比较多，最后结束的时候回出现基线上漂~~~~有啥意见交流 ...

样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰


是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-12 00:27:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whutxd5

引用回帖:
Originally posted by xiaoxiao7239 at 2010-08-10 06:44:03:
两种可能:1、上液相的样品浓度太低；2、没有选择样品的最佳吸收波长。类黄酮我记得好像是278nm，不晓得lz用的检测波长是多少。

样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰


是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。
赞一下 回复此楼
8楼2010-08-12 00:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlie524

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by whutxd5 at 2010-08-12 00:27:05:



样品浓度  大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最 ...

我的信号强度跟你的也差不多~~~你用甲酸水？还是甲醇水？另外，你黄酮的溶解性好吗？进样量是多少？还有你的样品原料是啥？物质咋吗？我的峰的分离度不是很好~~~有时都凑在一起
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-08-12 08:59:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 whutxd5 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 22专硕求调剂 +6 haoyun上岸 2026-04-11 8/400 2026-04-11 23:21 by labixiaoqiao
[考研] 求调剂 +11 月@163.com 2026-04-07 13/650 2026-04-11 22:55 by BruceLiu320
[考研] 求调剂 +6 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-11 20:14 by 逆水乘风
[考研] 0854求调剂 +7 assdll 2026-04-05 7/350 2026-04-11 10:34 by Delta2012
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +17 努力奋斗112 2026-04-06 20/1000 2026-04-11 00:31 by wangjihu
[考研] 一志愿211，化学310分，本科重点双非，求调剂 +23 努力奋斗112 2026-04-08 23/1150 2026-04-10 23:29 by 314126402
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +6 笑笑袁 2026-04-10 6/300 2026-04-10 11:54 by 高维春
[考研] 材料复试求调剂 +20 xhhdjdjsjks 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 10:25 by 孙小小12457
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 085801 总分275 本科新能源 求调剂 +8 bradoner 2026-04-08 9/450 2026-04-09 13:43 by only周
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 0703化学调剂 348分 +14 唉我超真没招了 2026-04-06 15/750 2026-04-08 19:16 by 我减肥1
[考研] 264求调剂 +11 麦小叮当 2026-04-07 11/550 2026-04-08 16:05 by 一只好果子?
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭